将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量和流量比来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定纳米脂质颗粒LNP结构,确认去除产品中残留的有机溶剂。 mRNA包裹后续工艺一...
mrna-lnp制备mRNA-LNP的制备方法有多种,包括脂质体挤出法、薄膜水化法、纳米沉淀法、微流控以及冲击射流式混合法等。不同的制备方法有各自的优势与缺陷,制备出的LNP能否保持其囊泡均匀稳定,成了评价LNP质量的重要指标。 同时,mRNA-LNP的制备也涉及到一些特定步骤。例如,在脂质体法制备过程中,需要先将磷脂等成分...
对制备的LNP包封mRNA的效果进行测定。 实验原理: Quant-iT™RiboGreen®RNA试剂是一种超灵敏的荧光核酸染色剂,可检测溶液中1-200 ng的核酸,这种核酸染料无法透过LNP,因此只有游离的未被LNP包载的核酸可以被结合。Triton-100作为一种表面活性剂常被用做破乳剂,使用1%的Triton-100处理获得的LNP-mRNA可以使包载的...
mRNA 的稳定性和完整性对于其功能的发挥至关重要,LNP 作为 mRNA 的载体,通过特定的技术手段将 mRNA 包裹在其中,以保护 mRNA 不受体内酶的降解,同时帮助 mRNA 有效地进入细胞,如果 mRNA 在 LNP 中发生降解,将会影响其编码蛋白质的...
实验方案:微流控混合方式制备包裹mRNA的脂质纳米颗粒(mRNA-LNP的制备) 实验目的: 参照Moderna、BioNtech 和 Alnylam 的新冠疫苗配方,以SM102、ALC-0315、MC3为主要阳离子脂质制备包载 mRNA 的脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles, LNPs)。 实验原理: ALC-0315、 MC3、和 SM102 是三种可用于人体的脂质。在酸性条件下...
3.根据LNP制备量需求选择注射器规格,本案例左右注射器均选择10 mL注射器。左注射器溶液体积设置为9 mL,右注射器设置为3 mL,其中左泵流速为4.5 mL/min,右泵流速为1.5 mL/min,混合流速为6 mL/min;4.点击混合进入电机运动控制界面,点击双泵推进,开始制备LNP。
移液器混合法是制备小批量LNP,用于体外实验的最常用方法,只需通过手动快速上下移液混合两种溶液,使其在特定时间内形成纳米颗粒。操作简单、成本低,通常适用于~6/18至~30/90(µL/µL,乙醇/水溶液)规模。 移液器混合法的操作步骤为:脂质...
LNP-mRNA的包封制备:需要将乙醇-脂质混合物与含有mRNA分子的酸性水缓冲液(pH 4~5)按1:3的比例,通过微流控装置进行混合,实现自组装。组装过程中,可电离阳离子脂质首先被质子化并带正电荷,通过静电吸附作用与带负电荷的mRNA结合。同时,其它辅助脂质包括磷脂、胆固醇、PEG脂质在这之上进一步组装,形成稳定的LNP-mRNA。
瀚海新酶采用简洁快速，稳定性高、易于生产放大的微流控技术进行mRNA-LNP的制备，将mRNA包裹在LNP中，有效地保护mRNA并将其转运至细胞中发挥功能。瀚海新酶可提供保姆式的全套解决方案，客户可从序列设计至LNP制备的任何步骤选择定制化生产，最大程度地帮助客户多快好省的拿到所需mRNA原液和LNP原液。交付标准 过往案例...