除后回收,位于内膜的 LC3-II 则与包裹的内容物一起,被溶酶体降解。 LC3A/B/C 有种属细胞/组织分布特点 LC3/Atg8 被具有蛋白内切酶活性的 Atg4在羧基端剪切,生成胞质 LC3-I。LC3-I通过Atg7和Atg3(分别对应E1和E2样酶)参与的泛素 样反应,使磷脂酰乙醇胺(PtdEth,PE)偶联,生成脂质化形式的LC3,也 称作LC3-...
是不是LC3-A/B就是LC3-I/II呢? 其实不然。在哺乳动物中,存在 4 种LC3异构体(LC3A、LC3B、 LC3B2和 LC3C),在不同的组织细胞中表达会有差异。目前主要研究的是LC3A和LC3B,LC3C在许多细胞中表达量很低,研究的也较少。其中每种异构体都可以有I和II两种亚型。 想要观察自噬有没有参与,最简单的就是做LC3...
在实验室中，我们常遇到LC3A/B的标签，这是对哺乳动物中四种LC3异构体（LC3A、LC3B、LC3B2和LC3C）的简化描述。LC3A和LC3B是主要的研究对象，而LC3C由于低表达和研究较少，通常被忽视。LC3-I和LC3-II的区分是理解自噬状态的关键，但要注意，抗体检测的抗原表位通常位于LC3的N端，这可能导致LC3-II/...
当然,通过使用抗LC3A/B抗体,同时检测LC3A和LC3B,可以大大增加实验的成功率。 图2:小鼠组织/部分细胞中LC3A和LC3B的mRNA水平差异(来源: Biogps) LC3 的来去是一个动态过程 正如前言所述,LC3-I和II存在一个生成-降解的动态过程。自噬小体有一个生成、融合、降解的过程,即“自噬流”。所以,单时间点LC3-II的表...
然后立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽，暴露甘氨酸，这个是LC3-I，胞浆分布。自噬过程中，LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下（和泛素修饰过程很像），与磷脂酰乙醇胺共价结合，这个才是LC3-II，结合在自噬体膜上。LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰，导致电荷的变化，使得迁移率更快，所以SDS-PAGE...
LC3是公认的自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。在哺乳动物中,LC3包含3种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中...
LC3A/B的抗体均可。脂化、膜相关蛋⽩超声确保充分裂解 ⼩分⼦量蛋⽩~15%分离胶，0.22um印记膜转膜 LC3-II可被溶酶体降解加⼊⼯具药（如氯喹等），阻断降解 LC3-I/II的形成和降解是⼀个动态过程瞬时LC3-II表达不能反映⾃噬程度，需配合使⽤ ⼯具药（如氯喹）分析⾃噬变化 正⽂ 在进...
由于LC3 的动态变化以及 LC3A/B/C 具有种属细胞/组织分布特点,以及 LC3-I 对反复冻融的敏感性,在采用 Western blot 等实验方法检测 LC3 时应注意: 第二类 P62 扮演的重要角色 根据底物靶向运输至溶酶体的方式不同,自噬可分为巨自噬...
LC3是公认的自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。在哺乳动物中,LC3包含3种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中,因此需要用不同的抗体去鉴定这3种亚型。
LC3/Atg8 被具有蛋白内切酶活性的 Atg4 在羧基端剪切,生成胞质 LC3-I。LC3-I 通过 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)参与的泛素样...