由于LC3是脂化和膜相关蛋白,在细胞裂解时,可在冰上短暂超声,以促进蛋白溶解,使得LC3顺利从膜上解离。此外,LC3-II的分子量约16KD,LC3-I在电泳后停留在14KD处,两者均为小分子量蛋白,且差距仅2KD。因此在WB时要注意使用高浓度分离胶进行分离(建议约15%),转膜时使用小孔径0.2um的NC膜,采用恒流200mA,转膜40min...
LC3-I 和 LC3-II 是小分子蛋白 LC3-I 的分子量约 16 KD,由于 LC3-II 接合了 PE 基团,所以理论上,LC3-II 的分子量比 LC3-I 更高。但是,由于带负电的 PE 改变了 LC-II 的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II 在电泳后,停留在了更小分子量(约 14 KD)处。 小分子量、LC...
网友 1 最佳答案 回答者:网友 一篇所握必别纸圆阳组言成文献说,LC3-II疏水极性较强,所以电泳迁移率比LC3-I快。LC3-II的实际分子量比LC3-I大,但是表观分子量较小,在SDS-PAGE电泳中,LC3-II分子量定量为14kD,LC3-I分子量定量为啊完队16kD。可以看下面这篇文献的Introduction部分。参考文献:Mizushima N, Y...
LC3-I 和 LC3-II 是小分子蛋白,虽然理论上LC3II分子量更大,由于带负电的PE改变了LC3II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高。所以,LC3II电泳后停留在更小分子量(约14kDa)。 5.由于LC3-I 与 LC3-II 分子量小,又仅有 2 KD 差异,WB注意选用高浓度分离胶(约15%),转膜使用0.22μm转印膜,...
LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,理论上LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以在SDS-PAGE中LC3-II显得分子量比LC3-I小。 LC3-I与LC3-II仅有2KD差异...
LC3-I 和LC3-II 是小分子蛋白 LC3-I的分子量约16KD,由于LC3-II接合了PE基团,所以理论上,LC3-II的分子量比LC3-I更高。但是,由于带负电的PE改变了LC-II的性质,使其疏水性更强,导致其在电泳中迁移率更高,所以,LC3-II在电泳后,停留在了更小分子量(约14KD)处。
LC3是一个膜相关蛋白，裂解细胞时，需使用冰上短暂超声促进蛋白溶解，将LC3从膜上解离。LC3-I与LC3-II的分子量虽仅有2KD差异，但在电泳中，由于PE基团的影响，LC3-II的迁移率更高，停留在更小分子量处。综合来看，LC3检测需要考虑到LC3的动态生成与降解，选择合适的抗体与方法，理解LC3的来源与分布...
LC3抗体检测抗原表位位于LC3的N端，由于PE基团结合导致N端区域构象变化，抗体对LC3-II亲和性更高，LC3-II/ LC3-I 比值存在较大误差。LC3-I对反复冻融更为敏感，需用新鲜制备样品上样，以防止LC3-I检测不到。LC3-I和LC3-II分子量有2KD差异，但在WB中需使用高浓度分离胶进行分离，转膜时注意使用小...
是微管相关蛋白轻链3(MAP1LC3)的简称，它贯穿整个自噬过程，哺乳动物的LC3可分为三种：LC3A、LC3B和LC3C。自噬发生时，LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中，LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为 14kD 的 LC3-II，并...
哺乳动物中有三种同工型LC3蛋白(LC3A、LC3B和LC3C),它们在自噬过程中发生相关的翻译后修饰。 LC3蛋白首先会在合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,产生细胞浆定位的LC3-I。 在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为14kD的LC3-II,并定位到自噬小体中。 LC3-II/I比值...