RFP-GFP-LC3自噬双标质粒 参考报价:1千-3千 品牌:纽赫生物 产地:上海 型号:RFP-GFP-LC3自噬双标质粒 样本: 纽赫生物科技(上海)有限公司 获取底价在线客服 查看同类文库/载体构建仪器 型号品牌PIPES指数 7.9 载体构建金开瑞7.9 二代建库测序服务诺禾致源7.9 ...
摘要:为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降,P62蛋白表达量...
因此,日本学者开发了一种双荧光的质粒,即ptfLC3,采取RFP和GFP两种荧光双标记。这种双标质粒的特点是:mRFP用于标记及追踪LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。在显微镜成像后,红绿荧光进行merge处理,...
P1333/pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒,质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成,质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的质粒。 详细内容 公司简介 上海远慕生物专业供应抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲...
自噬流目前常用的检测方法有GFP-LC3-RFP-LC3ΔG。GFP-LC3在自噬溶酶体中很不稳定，而RFP-LC3ΔG则仍可以留在细胞质中，同时观察两种荧光颜色，可以用于监测自噬通量。但是上述这种方法由于需要转染质粒，一方面实验操作麻烦，另一方面也在部分实验中备受限制。之后会为大家详细介绍一种无需转染的自噬流检测方法。通过...
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pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG载体序列是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG...
中国试剂级别: 分子生物学级代理, RFPGFPLC3英文名称: RFPGFPLC3价格 报价,null 产品货号: 4371价格 报价
方法 构建含 RFP-GFP-LC3 基因的慢病毒重组质粒载体,将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染 HEK293T 细胞,收集病毒上清后感染 RAW264. 7 细胞。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达 RFP-GFP-LC3 的RAW264. 7 细胞株,用荧光显微镜和流式细胞术分析感染效率。饥饿处理稳定感染细胞,荧光显微镜下观察 RFP-GFP-LC3 斑点。结果 ...
将GFP-LC3质粒转染入目的细胞,24小时后就可用荧光显微镜进行活体动态观察。正常牛理环境下,LC3在胞质内弥散分布。自噬激活时,LC3-Ⅱ聚集于自噬体膜上。通过转染GFP-LC3融合蛋白的表达,理论上,根据GFP荧光颗粒聚集的密集程度和分布可反映Lc3的表达水平和细胞内定位,因此可以判断细胞自噬的发生情况。如图5-7-5所示,...