英文名称:pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒 保质期:3个月/12个月以上 保存条件:-20℃/-80℃ pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒信息 规格:2ug 保质期:3个月 保存温度:-20℃ 使用说明1、收到质粒干粉后请5000rpm离心1min,再加入20ul ddH2O溶解质粒 ...
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1 μM Obatoclax处理K1细胞24h后，GFP-RFP-LC3阳性自噬斑点显著增加；TEM观察表明(图B)，Obatoclax处理后，K1细胞出现与溶酶体共定位的自噬囊泡形成，并且损伤的溶酶体或大泡明显增加，间接表明Obatoclax中和了溶酶体。
摘要:为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降,P62蛋白表达量...
产品名称:P1333/pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG哺乳自噬质粒原核抗性: 氨苄青霉素Amp筛选标记: 嘌呤霉素Puro克隆菌株: 大肠杆菌Stbl3培养条件: 37℃,LB特点:是染色质外的双链共价闭合环形DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,<15kb的小质粒比较容易分离纯化...
利用绿色荧光蛋白（GFP）在酸性环境中淬灭的特性，研究人员开发出了GFP-LC3工具检测自噬，可使用流式细胞仪定量检测，但使用荧光显微镜检测效果不够理想。2.3.2 RFP-GFP-LC3 在GFP-LC3的基础上，研究人员开发了GFP-RFP-LC3工具，红色荧光蛋白（RFP）在酸性环境中信号稳定。报告基因发出红色和绿色的荧光，图像重合时...
质粒名称: pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG 出品公司: Addgene 目录编号: 84572 存储实验室: Noboru Mizushima 载体骨架基本信息 载体名称: pMRX-IP 载体出品公司: -- 载体抗性: 氨苄青霉素 空载体大小: 6100 bp 完整质粒大小: 8300 bp 载体修饰: -- 载体类型: 哺乳动物表达,逆转录病毒 筛选标记: 嘌呤霉素 ...
自噬流目前常用的检测方法有GFP-LC3-RFP-LC3ΔG。GFP-LC3在自噬溶酶体中很不稳定，而RFP-LC3ΔG则仍可以留在细胞质中，同时观察两种荧光颜色，可以用于监测自噬通量。但是上述这种方法由于需要转染质粒，一方面实验操作麻烦，另一方面也在部分实验中备受限制。之后会为大家详细介绍一种无需转染的自噬流检测方法。通过...
目前文献对自噬过程进行观察和检测常用的策略和手段有:通过western blot检测LC3的剪切;通过电镜观测自噬体的形成;在荧光显微镜下采用GFP(-RFP)-LC3等融合蛋白来示踪自噬体形成以及降解。近几年对自噬流的研究日趋增多,针对于此我们汉恒生物科技(上海)有限公司自主研发了用于实时监测自噬(流)的mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP...
目的建立能够稳定表达红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白轻链3(RFP-GFP-LC3)的小鼠RAW264.7巨噬细胞。方法构建含RFP-GFP-LC3基因的慢病毒重组质粒载体,将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,收集病毒上清后感染RAW264.7细胞。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞株,用荧光显微镜和流式...