1) 可选择与您研究材料相匹配的标准操作流程进行细胞裂解。Tip 1:高浓度的去垢剂会干扰免疫沉淀效果。所以可先用小体积RIPA(Cat No. PR20001)裂 解细胞制备蛋白裂解物,在开始IP捕获前,再补加1 X PBS(Cat No. PR20023)或孵育 液稀释到需要的体积。Tip 2:使用足量的蛋白裂解物:单管IP实验,推荐裂解...
在进行IP实验时,通常需要以下材料和设备:静脉穿刺针、消毒酒精、导管贴、透明胶带、生理盐水、生理盐水注射器、针头、手套、试剂、离心机、恒温器等。 第二步:实验前准备 在进行实验之前,需要进行一些准备工作。首先,确认实验所需的试剂、材料和设备都已经准备齐全,并检查其有效性和完整性。其次,准备实验操作所需的...
免疫沉淀(免疫沉淀,IP)实验步骤介绍 1.收获细胞,加入适量的细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),在冰上或4°C下裂解30分钟,以12,000g离心30分钟,取上清液;2.取少量裂解液用于蛋白质印迹分析,在细胞裂解液中加入1μg相应抗体和10-50μl蛋白A / G-珠,然后缓慢摇动溶解。3.进行免疫沉淀后,在4°C下...
最后得步骤是将沉淀物解离。我们使用含有高盐或者强酸得溶液。来将蛋白和抗体从珠子上分离出来。这一步可以让我们得到纯净得目标蛋白。通过蛋白定量、SDSPAGE电泳等方法我们就可以检测出目标蛋白的纯度与表达情况!当看到清晰的条带时真是觉得所有的努力都值得了! 免疫沉淀实验得步骤包括:样品制备、抗体加入、珠子结合、...
CO-IP实验步骤 1. 样品准备:收集细胞或组织样品,并进行细胞裂解或组织破碎,得到总蛋白提取物。2. 抗体结合:将目标蛋白的特异性抗体与蛋白A/G磁珠结合,形成抗体磁珠复合物。3. 免疫沉淀:将抗体磁珠复合物加入总蛋白提取物中,使抗体与目标蛋白结合,形成免疫复合物。4. 洗涤:用洗涤缓冲液洗涤免疫复合物,...
IP(免疫沉淀)是一种常用的蛋白质分析方法,可以用于分离和富集特定的蛋白质。以下是IP实验的基本步骤:3.1 样品准备 首先,需要准备含有目标蛋白质的样品。样品可以是细胞提取物、组织提取物或纯化的蛋白质溶液。3.2 抗体选择 根据目标蛋白质的特异性,选择适当的抗体。抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体,也可以是...
IP实验步骤范文 实验材料: 1.组织样本(动物组织或细胞) 2.细胞裂解缓冲液 3.超速离心机 4.抗体 5.蛋白质电泳凝胶(例如SDS-凝胶) 6.蛋白质电泳装置 7.蛋白质转移膜(例如PVDF膜) 8.蛋白质转移装置 9.蛋白质荧光探针或酶标记二抗 10.化学发光底物 11.蛋白质检测设备(例如化学发光仪或蛋白质免疫印迹仪) 实验...
Co-IP(动物)实验原理与操作步骤讲解,手把手教学!, 视频播放量 1608、弹幕量 0、点赞数 51、投硬币枚数 6、收藏人数 185、转发人数 5, 视频作者 金开瑞生物, 作者简介 实验问题咨询及生物类合作咨询:13343461158; 蛋白抗体、检测分析/分子互作、基因/引物合成各生物领域
在进行IP与CO-IP实验之前,样本的处理是非常重要的。样本可以是细胞提取物或组织提取物。以下是样本处理的步骤:1.1 细胞培养与收集 首先,将目标细胞培养在适当的培养基中,使其达到合适的生长状态。然后,使用适当的方法(如洗涤、剥离或裂解)收集细胞。1.2 细胞裂解 将收集到的细胞进行裂解,以释放细胞内的...