1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。 六、HPLC纯度检测注意事项(SEC-HPLC) 1.色谱...
SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,通过分析蛋白质样品在凝胶柱中的分离情况可以评估样品的纯度。在进行SEC-HPLC检测时,需要准备好合适的设备和试剂,进行样品制备和注射,设置合适的流动相条件和检测器参数,最后进行数据分析和结果解释。发布于 2025-03-07 10:13・北京 ...
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用,导致峰展宽...
以实验室运用HPLC-SEC-FLD,即结合高效液相色谱(HPLC)、大小排除色谱(SEC)和荧光检测器(FLD)的分析技术,检测蛋白残留方法为例,方法分离和表征大分子或复杂样品中的成分,具有高灵敏度和高准确性,能够有效分离不同体积分子的蛋白质,并通过荧光信号检测特定的荧光基团。体积排阻色谱填料的孔径和样品分子的大小和分布...
以实验室运用HPLC-SEC-FLD,即结合高效液相色谱(HPLC)、大小排除色谱(SEC)和荧光检测器(FLD)的分析技术,检测蛋白残留方法为例,方法分离和表征大分子或复杂样品中的成分,具有高灵敏度和高准确性,能够有效分离不同体积分子的蛋白质,并通过荧光信号检测特定的荧光基团。
Waters公司分别制备了两根超宽孔径SEC原型色谱柱(Prototype),一根装填有平均孔径为136nm的颗粒A,用来分析质粒DNA;另外一根装填有孔径为127.5nm的颗粒B,用来分析mRNA和mRNA-LNP。颗粒A有较宽的孔径分布,而颗粒B有较窄的孔径分布。图1: 两根超宽孔隙SEC原型色谱柱理化特性和孔径分布 三、超宽孔径SEC检测质粒DNA...
HPLC-SEC检测原理及蛋白残留检测相关应用 体积排阻色谱法(SizeExclusionChromatography,SEC)是一种基于分子尺寸差异的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶固定相的孔径分布,通过分子在溶液中的流体力学体积(而非绝对分子量)实现分离,可以快速地确定样品混合物的复杂性,给出各个组分的大概分子量及分布。
通过优化SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离,从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床,而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中...
一种基于HPLC-SEC的外泌体检测方法及其应用.pdf,本发明提供了一种基于HPLC‑SEC的外泌体检测方法及其应用,所述检测方法包括:(1)采用全波长扫描外泌体样品,获得最佳荧光检测波长为ex280nm/em573nm;(2)采用尺寸排阻色谱对外泌体样品进行分离和检测;检测所用的检测
@普仁仪器有限公司sec-hplc是检测什么的 普仁仪器有限公司 SEC-HPLC是一种用于检测蛋白质纯度和分子量分布的技术。它通过基于分子大小的分离,能够快速、准确地评估蛋白质样品的纯度和组成。这种方法比较适合分析蛋白质的聚合状态、分子量分布以及是否存在杂质或降解产物。