1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。 六、HPLC纯度检测注意事项(SEC-HPLC) 1.色谱...
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用，导致峰展宽...
Zenix SEC-300 色谱柱（孔径 30nm）和 SRT SEC-1000 色谱柱（孔径 100nm）适用于测定 mRNA 聚集体，但是，这两种色谱柱无法用来检测尺寸更大的mRNA与LNP形成的聚集体。因此，开发分离超大尺寸分析物的色谱柱有着非常广阔的市场需求。二、超宽孔径SEC原型色谱柱介绍 mRNA 和质粒DNA（pDNA）的特点是分子量大，...
首先,需要准备好SEC-HPLC系统,包括色谱柱、流动相、检测器等。选择合适的色谱柱是关键,一般使用具有适当分子量分离范围的凝胶柱,如Sephadex或Superdex系列。流动相的选择要根据样品的特性来确定,常用的是缓冲盐溶液。检测器可以选择紫外(UV)检测器,以监测吸光度信号。 3.样品制备: 将待测蛋白样品进行适当的预处理,如...
Waters公司分别制备了两根超宽孔径SEC原型色谱柱(Prototype),一根装填有平均孔径为136nm的颗粒A,用来分析质粒DNA;另外一根装填有孔径为127.5nm的颗粒B,用来分析mRNA和mRNA-LNP。颗粒A有较宽的孔径分布,而颗粒B有较窄的孔径分布。 图1: 两根超宽孔隙SEC原型色谱柱理化特性和孔径分布 三、超宽孔径SEC检测质粒DNA聚集...
SEC-HPLC分析已经成为定性和定量评估重组蛋白纯度和聚集度的金标准。义翘神州开发出一系列SEC-HPLC验证的重组蛋白产品,以支持更高标准的相关研究。
四、超宽孔径SEC检测mRNA聚集体 研究人员采用超宽孔径SEC原型色谱柱检测来自不同供应商的 EGFP mRNA。与供应商 A 相比,供应商 B 的样品在 31.26 min 的EGFP mRNA面积明显减少。此外,供应商 B 的样品在17.25 至 30.20min位置显示出更多的聚集体(59.7% vs 17.8%)。供应商 B 的样品主峰位置在 37.39 min,对应...
通过优化SEC-HPLC方法，我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度，为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离，从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床，而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中...
一、高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离,从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床,而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中蛋白质的峰形和相对峰面积,可以评估蛋白质纯度的高低。
四、超宽孔径SEC检测mRNA聚集体 研究人员采用超宽孔径SEC原型色谱柱检测来自不同供应商的 EGFP mRNA。与供应商 A 相比,供应商 B 的样品在 31.26 min 的EGFP mRNA面积明显减少。此外,供应商 B 的样品在17.25 至 30.20min位置显示出更多的聚集体(59.7% vs 17.8%)。供应商 B 的样品主峰位置在 37.39 min,对应...