SEC-HPLC(尺寸排阻高效液相色谱)是一种基于分子大小分离的HPLC技术。它利用具有不同孔径的固定相(填料)对样品中的蛋白质进行分离,使得大分子先于小分子通过色谱柱,从而实现蛋白质的分离和纯度分析。 二、HPLC蛋白纯度分析原理 HPLC蛋白纯度分析的原理基于蛋白质在移动相(溶剂)中通过固定相(色谱柱填料)时的相对迁移速率。
SEC-HPLC的原理基于样品中分子的大小差异。样品溶液通过填充有微孔固定相的色谱柱时,分子会根据其尺寸的不同在固定相中表现出不同的渗透特性。大分子会较快地通过色谱柱,因为它们能够进入微孔固定相并绕过固定相进行运动。相反,小分子会进入微孔固定相,减慢其在柱中的运动速度。因此,大分子进出色谱柱的时间较短,而...
SEC-HPLC是一种基于蛋白质分子大小的分离技术。它利用一个多孔的凝胶柱,较大的蛋白质分子无法进入凝胶内部,因此会在柱上流动速度较快,而较小的杂质分子则能进入凝胶内部,流动速度较慢。通过监测流出柱的吸光度信号,可以得到蛋白质样品的分子大小分布情况,从而评估样品的纯度。 2.准备工作: 首先,需要准备好SEC-HPLC...
为了进一步提高高效SEC-HPLC方法的准确性和灵敏度,可以考虑以下因素:优化柱选取和流动相组成、优化样品制备和注射条件、调整检测器参数和信号处理等。此外,使用标准样品进行方法验证和校正也是确保结果准确性的重要步骤。 高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法,对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优...
它是一种以液相为介质,在高压下,以色谱柱为分离器进行组分分离,并通过检测器对组分进行监测和分析的方法。 HPLC原理主要基于分离的原理,即将混合物通过色谱柱,利用各成分的化学特性,通过在静态相和动态相的分配系数不同的特点,分离出各成分。这些性质通常是极性、疏水性、分子质量、极性官能团等。在分离过程中,样品...
- HPLC纯度(分子筛) - SEC-MALS分子量 SEC-MALS原理 SEC:尺寸排阻色谱法;有时称为GPC/GFC,即凝胶渗透色谱法或凝胶过滤色谱法。 GPC/SEC是根据不同的分子具有不同的流体体积而进行分离,而不是根据分子的分子量大小。色谱柱中填充了表面具有很多小孔的填料颗粒。当样品分子随流动相一起流经填料时,尺寸较小的分...
HPLC的原理是将样品采用称为流动相的液体溶解,然后以高压将其从一个容器中泵入一块填充了固定相的柱内,通过固定相中的孔隙进行分离。固定相是由比试样固体颗粒略粗的颗粒组成的,这些颗粒可以吸附样品分子并使其在固定相与流动相之间发生多次分配。固定相和流动相可以根据样品进行选择和调整。通过缓慢和自然地将分子...
例如, 提到SEC是监测单克隆抗体聚合体的理想选择,但没有提到与质谱联用的具体应用。 提到SEC与下游光散射检测和超高效液相色谱(UHPLC)结合使用,可以克服SEC的许多限制,但也没有详细说明SEC与质谱联用的具体优势。 在使用SEC分析抗体聚集比例时,如何克服其对高浓度样品处理能力有限的局限性?
百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。