sso法 hlaHLA-DNA分型试剂盒(SSO法)使用序列特异性寡核苷酸探针技术(Sequence Specific Oligonucleotide,SSO),又称等位基因特异性寡核苷酸探针技术(Allelic Specific Oligonucleotide,ASO)。这种技术通过合成一组与一种或多种等位基因序列互补的寡核苷酸探针,并使之与特定片段的PCR扩增产物在一定条件下杂交,然后根据探针与...
目前HLA-DNA分型均以PCR技术为基础，主要包括：聚合酶链反应寡核苷酸探针杂交（PCR/SSO）、顺序特异引物聚合酶链反应技术（PCR/SSP）、限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR/RFLP）、聚合酶链反应单链构象多态性（PCR/SSCP）、基于序列的HLA分型法（SBT）等，最常用的主要有三种：PCR/SSP、PCR/SSCP、PCR/SSO，...
《PCR/SSO鉴定我国彝族HLA系统D区核苷酸顺序特征》是依托上海交通大学，由费虹明担任项目负责人的面上项目。项目摘要 80例彝族随机标本，用PCR法扩增HLA-DRBl、DRB3、DQA1、DQB1基因座第二外显子，用第11届国际组织相容性会议的一套序列特异的寡核苷酸探针进行斑点杂交，根据各等位基因核苷酸序列特征，定出每一样本的...
②聚合酶链式反应寡核苷酸探针杂交方法PCR-SSO(sequence specifie oligonucleotide，SSO)。原理是PCR基因片段扩增后利用序列特异性寡核苷酸探针，通过杂交的方法进行扩增片段的分析鉴定。③聚合酶链式反应单链构象多态性分析(PCR- single strand conformational polymorphism，PCR-SSCP)。PCR产物经变性为DNA单链，用聚丙烯酰胺...
HLA分型SSO法 简介 LABType® SSO使用序列特异性的寡核苷酸探针连接到荧光染色的微珠上来检测样品DNA编码的等位基因。LABType® SSO技术只需PCR扩增靶DNA,杂交和检测在同一个反应混合物中完成,所以该方法既适于小规模又适于大规模的的HLA分型实验。相对于淋巴细胞毒试验的实验结果(1=阴性--- 8=阳性),LABType...
目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异性引物,借助PCR技术获得HLA型别特异的扩增产物,可通过电泳直接分析带型决定HLA型别,从而大大简化了实验步骤。
PCR-SSPSBT目的建立HLA分型基因微阵列新技术,并与PCR-SSO(PCR-顺序特异性寡核苷酸),PCR-SSP(PCR-序列特异性引物)及SBT(DNA测序)进行方法学比对.方法基于反向SSO原理设计引物和探针→探针点样→标本处理和标记→杂交检测分析,其依据的原理和主要步骤为:(1)PCR扩增;(2)DNA杂交;(3)酶联染色;(4)结果判断.以此...
SSO原理 LABType®在反向SSO DNA分型法中应用Luminex技术。首先,靶DNA使用组特异性引物进行PCR扩增。PCR产物是被生物素化的,可以使用R-藻红蛋白结合链霉亲和素(SAPE)进行检测。 PCR产物先被变性,然后再与包被在微珠上的DNA-探针互补杂交。流式分析仪LABScan ™100(Luminex100/200)或LABScan ™3D(Luminex®...
HLA分型SSO法 简介 LABType® SSO使用序列特异性的寡核苷酸探针连接到荧光染色的微珠上来检测样品DNA编码的等位基因。LABType® SSO技术只需PCR扩增靶DNA,杂交和检测在同一个反应混合物中完成,所以该方法既适于小规模又适于大规模的的HLA分型实验。相对于淋巴细胞毒试验的实验结果(1=阴性--- 8=阳性),LABType...