(6)杂蛋白是目的蛋白的截断蛋白:检查是否存在可能的内部翻译起始位点(若 HisTag 序列构建于目的蛋白 C 端),或翻译提前终止(若 HisTag 序列构建于目的蛋白 N 端);避免目的蛋白在纯化过程中降解,如保持在 4℃进行操作,使用蛋白酶抑制剂等。 珠海舒桐可提供从密码子优化、载体构建到重组蛋白表达及纯化的大肠杆菌蛋...
His标签是最简单、使用最广泛的纯化标签之一,组氨酸残基易与过渡金属离子配位如固定在珠子或树脂上的Ni2+或Co2+,用于纯化。重组蛋白纯化的多聚组氨酸系统已成功用于各种表达系统,包括细菌、酵母细胞、植物细胞和哺乳动物细胞系统。 His标签序列及大小 His标签(又称多组氨酸标签),由6到10个连续的组氨酸残基组成。最常用...
在N端放置标记的另一个优点是,由于大多数内蛋白酶在识别位点的C端或附近切割标记,可以更干净地去除标签蛋白。 如下图所示:组氨酸重组蛋白构建的时将His标签放在目的蛋白的N端,后跟相应的蛋白酶酶切位点,其N-C端的结构为:His-蛋白酶酶切位点-目的蛋白。通过His标签在柱上富集重组目的蛋白,再采用相应的蛋白酶进...
His-Tag是一段由6个组氨酸残基(His)组成的多肽序列。His-Tag可以在目标蛋白质的N端、C端或内部位置插入,使得目标蛋白与His-Tag融为一体。His-Tag具有亲和力,可以与金属离子(如Ni2+、Co2+)发生配位作用,形成稳定的His-Tag-金属离子络合物。通过His-Tag与金属离子之间的相互作用,可以实现对目标蛋白的快速纯化和鉴定...
小序列影响小:His-tag非常小,His-tag对目的蛋白本身特性几乎没有影响,不会改变目的蛋白本身的可溶性和生物学功能;且在融合蛋白结晶后对蛋白的结构没有影响; 免疫原性低:His-tag的免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射入动物体内进行免疫并制备抗体;
组氨酸标签也称His-tag,是一种最简单、应用最广泛的纯化标签,具有六个或更多连续的组氨酸残基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能构成表位利于检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸标签的特点可总结为以下几点: 1.His标签分子量小,只有~0.84K...
His-tag是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签,其序列为6个组氨酸HHHHHH,其特点是分子量小,只有不到0.84 KD,基本不改变蛋白质的生物结构,不改变蛋白质的溶解性,更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便。根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理,His-Tag 可结合在目的蛋白的 C 末端或 N 末端,形成...
His-Tag是短肽序列,通常由六个组氨酸残基组成,与重组蛋白融合。His-Tag使得利用固定金属亲和层析(IMAC)特异而高效地纯化蛋白质成为可能,其中His-Tag与固定在固体支持上的金属离子(如镍或钴)结合。这种技术能够快速高产地纯化His-Tag重组蛋白,便于后续的结构研究、酶活性测定和蛋白质相互作用分析等应用。
His-Tag是短肽序列,通常由六个组氨酸残基组成,与重组蛋白融合。His-Tag使得利用固定金属亲和层析(IMAC)特异而高效地纯化蛋白质成为可能,其中His-Tag与固定在固体支持上的金属离子(如镍或钴)结合。这种技术能够快速高产地纯化His-Tag重组蛋白,便于后续的结构研究、酶活性测定和蛋白质相互作用分析等应用。
His-tag是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签,其序列为6个组氨酸HHHHHH,其特点是分子量小,只有不到0.84 KD,基本不改变蛋白质的生物结构,不改变蛋白质的溶解性,更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便。根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理,His-Tag 可结合在目的蛋白的 C 末端或 N 末端,形成...