序列：典型序列为HHHHHH（6×His），可根据需求延长至10×His。位置：通常位于蛋白的N端或C端，避免嵌入蛋白内部影响结合效率。灵活性：可与其他标签（如FLAG、HA）组合使用（如His-FLAG），提高功能多样性。3. 作用机制 金属螯合层析（IMAC）：结合：His Tag与镍柱（Ni-NTA）或钴柱上的金属离子结合，
在N端放置标记的另一个优点是,由于大多数内蛋白酶在识别位点的C端或附近切割标记,可以更干净地去除标签蛋白。 如下图所示:组氨酸重组蛋白构建的时将His标签放在目的蛋白的N端,后跟相应的蛋白酶酶切位点,其N-C端的结构为:His-蛋白酶酶切位点-目的蛋白。通过His标签在柱上富集重组目的蛋白,再采用相应的蛋白酶进...
定义：由6-10个连续组氨酸（His）组成的短肽序列（如HHHHHH），通常添加在重组蛋白的N端或C端。作用原理：组氨酸的咪唑基团在生理pH下带正电，可与二价金属离子（如Ni²⁺、Co²⁺）螯合，实现蛋白分离或固定。2. 核心应用场景 蛋白纯化：金属螯合层析（IMAC）：将含His Tag的蛋白混合物流经镍柱（Ni-NT...
His-Tag 是最常用的蛋白纯化标签之一,由6~10个组氨酸(His)残基(通常是 6×His,即HHHHHH)组成,它是通过与过渡金属离子(Ni²⁺、Co²⁺、Zn²⁺)的螯合作用来实现亲和纯化的。 His-Tag的特性 1.分子量:极低(6×His ≈ 0.84 kDa),对蛋白结构和功能影响较小。 2.适用性:可用于原核(E. coli)、...
His标签是最简单、使用最广泛的纯化标签之一,组氨酸残基易与过渡金属离子配位如固定在珠子或树脂上的Ni2+或Co2+,用于纯化。重组蛋白纯化的多聚组氨酸系统已成功用于各种表达系统,包括细菌、酵母细胞、植物细胞和哺乳动物细胞系统。 His标签序列及大小 His标签(又称多组氨酸标签),由6到10个连续的组氨酸残基组成。最常用...
His-Tag是短肽序列,通常由六个组氨酸残基组成,与重组蛋白融合。His-Tag使得利用固定金属亲和层析(IMAC)特异而高效地纯化蛋白质成为可能,其中His-Tag与固定在固体支持上的金属离子(如镍或钴)结合。这种技术能够快速高产地纯化His-Tag重组蛋白,便于后续的结构研究、酶活性测定和蛋白质相互作用分析等应用。
综上所述，对His-tag技术的深入探索将极大地推动重组蛋白的研究与应用。未来，我们可以借助计算机辅助设计来优化His-tag序列，从而提升蛋白纯化的效率。同时，His-tag的应用并不仅限于蛋白纯化，通过与适当的螯合剂和荧光基团结合，或与特异性抗体偶联，His-tag还可用于蛋白示踪、定位以及免疫检测。
His-Tag是短肽序列,通常由六个组氨酸残基组成,与重组蛋白融合。His-Tag使得利用固定金属亲和层析(IMAC)特异而高效地纯化蛋白质成为可能,其中His-Tag与固定在固体支持上的金属离子(如镍或钴)结合。这种技术能够快速高产地纯化His-Tag重组蛋白,便于后续的结构研究、酶活性测定和蛋白质相互作用分析等应用。
组氨酸标签也称His-tag,是一种最简单、应用最广泛的纯化标签,具有六个或更多连续的组氨酸残基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能构成表位利于检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸标签的特点可总结为以下几点: 1.His标签分子量小,只有~0.84K...
His-Tag是一段由6个组氨酸残基(His)组成的多肽序列。His-Tag可以在目标蛋白质的N端、C端或内部位置插入,使得目标蛋白与His-Tag融为一体。His-Tag具有亲和力,可以与金属离子(如Ni2+、Co2+)发生配位作用,形成稳定的His-Tag-金属离子络合物。通过His-Tag与金属离子之间的相互作用,可以实现对目标蛋白的快速纯化和鉴定...