以His-GFP为例简述His-tag蛋白的纯化 His-tag是重组蛋白中最常用的融合标签之一。使用镍柱纯化His-tag融合蛋白的原理为:组氨酸的咪唑侧链可亲和结合镍、锌和钴等金属离子,在中性和弱碱性条件下带组氨酸标签的目的蛋白与镍柱结合,在低pH下用咪唑竞争洗脱。实验中一般选用6个组氨酸(His6-tag)的标签。His6标签有许多...
应用案例-使用HiScreen Ni FF纯化带有His标签的绿色荧光蛋白 材料与方法:本实验中,使用HiScreen Ni FF层析柱(预装有FF填料)纯化带有(His)6标签的绿色荧光蛋白GFP-(His)6,蛋白由大肠杆菌表达,粗样品共计40 mL。 实验结果:层析结果如下图所示。通过咪唑溶液线性梯度洗脱,在490 nm波长下,检测到洗脱峰,证明目的蛋白...
mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合的目标蛋白功能相互没有明显影响。这些荧光标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点: 1.不用破碎组织细胞和不加任何底物,直接通过荧光...
(2) HA标签：源于人类流感血凝素的99-106位氨基酸序列，HA标签具有较强的免疫原性，在蛋白分离纯化，检测示踪中应用较多，HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白.(3) GFP：绿色荧光蛋白，在488nm波长的激发光下发出绿光，被广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测...
一般来说,GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。 Myc抗体-抗Myc标签抗体 Myc标签是一个具有11个氨基酸的短肽(序列为EQKLISEEDL),来源于c-Myc蛋白的410-419位肽段,可放在C端或N端。Myc抗体能与...
使用含 HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖的 200 mL 柱在 3 小时内纯化 4 克以上的过表达 6xHis-GFP。以 20 mL/min 的流速上样一升裂解物,然后用含 30 mM 咪唑的洗涤缓冲液洗涤直至基线。使用含 300 mM 咪唑的缓冲液洗脱...
用 0.5 mL 结合缓冲液稀释三种蛋白质(6xHis 标签 BirA、6xHis 标签红色萤火虫荧光素酶或 6xHis 标签 GFP)的样本 (0.5 mL),并用 25 mL 沉淀微珠进行手动纯化。有关缓冲液成分和体积,遵循各自供应商的实验方案。Pierce Ni-NTA 磁性琼脂糖的得率更高...
mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合的目标蛋白功能相互没有明显影响。 CBP标签 CBP(Calmodulin-binding peptide钙调蛋白结合肽,CBP)由26个氨基酸残基组成,有一定的促表达效果,但...
当前位置:首页>产品中心>载体及菌株库 pBI221-His-GFP产品信息 订购信息 产品货号载体名称出品公司载体用途产品价格出货周期 HG-VZH1623pBI221-His-GFPHonorGene 植物表达载体 询价现货 产品参数 产品说明书 pBI221-His-GFP产品说明书.pdf 载体序列 pBI221-His-GFP质粒序列.txt 质粒图谱...