GFP抗体-抗GFP标签抗体 绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein,简称GFP),早在1962年在水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。一般来说,GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当...
GFP抗体-抗GFP标签抗体 绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein,简称GFP),早在1962年在水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。一般来说,GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当...
mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合的目标蛋白功能相互没有明显影响。这些荧光标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点: 1.不用破碎组织细胞和不加任何底物,直接通过荧光...
应用案例-使用HiScreen Ni FF纯化带有His标签的绿色荧光蛋白 材料与方法:本实验中,使用HiScreen Ni FF层析柱(预装有FF填料)纯化带有(His)6标签的绿色荧光蛋白GFP-(His)6,蛋白由大肠杆菌表达,粗样品共计40 mL。 实验结果:层析结果如下图所示。通过咪唑溶液线性梯度洗脱,在490 nm波长下,检测到洗脱峰,证明目的蛋白...
(1) GST标签：是谷胱甘肽S-转移酶，具体蛋白表达产率高，表达产物易于纯化、可溶等特性，常用于pull-down。(2) HA标签：源于人类流感血凝素的99-106位氨基酸序列，HA标签具有较强的免疫原性，在蛋白分离纯化，检测示踪中应用较多，HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白.(3) GFP：...
His 标签蛋白的亲和纯化。用B-PER 细菌蛋白提取试剂(货号 78243)和蛋白酶抑制剂制备含有过表达重组 6x His 标签的绿色荧光蛋白 (GFP) 的细胞裂解液(货号 78243)和蛋白酶抑制剂。蛋白浓度通过考马斯 Plus 蛋白分析(货号 23238)测定蛋白浓度...
如MBP标签,GST标签、GFP标签、FC标签、Halo标签等,这些标签的使用可以增加目标蛋白的溶解性,缺点是对于一些应用如结晶或生产抗体等,标签必须加以去除;另一种是识别固定化配体的短肽标签,如HA标签、Myc标签、Flag标签、His标签、Strep-tag II等,这一类标签一般不会干扰目标蛋白的生物活性,对于某些应用,小标签无需去除...
1、以His-GFP为例简述His-tag蛋白的纯化His-tag是重组蛋白中最常用的融合标签之一。使用镍柱纯化His-tag融合蛋白的原理为:组氨酸的咪唑侧链可亲和结合镍、锌和钴等金属离子,在中性和弱碱性条件下带组氨酸标签的目的蛋白与镍柱结合,在低pH下用咪唑竞争洗脱。实验中一般选用6个组氨酸(His6-tag)的标签。His6标签有...
用 0.5 mL 结合缓冲液稀释三种蛋白质(6xHis 标签 BirA、6xHis 标签红色萤火虫荧光素酶或 6xHis 标签 GFP)的样本 (0.5 mL),并用 25 mL 沉淀微珠进行手动纯化。有关缓冲液成分和体积,遵循各自供应商的实验方案。Pierce Ni-NTA 磁性琼脂糖的得率更高...
以His-GFP为例简述His-tag蛋白的纯化 His-tag是重组蛋白中最常用的融合标签之一。使用镍柱纯化His-tag融合蛋白的原理为:组氨酸的咪唑侧链可亲和结合镍、锌和钴等金属离子,在中性和弱碱性条件下带组氨酸标签的目的蛋白与镍柱结合,在低pH下用咪唑竞争洗脱。实验中一般选用6个组氨酸(His6-tag)的标签。His6标签有许多...