融合标签可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括Flag、His、myc、HA、GST、GFP等。标签抗体可用于检测或纯化表达载体上的标签序列，从而研究目标蛋白的表达水平与功能。标签抗体现在已经成为基因表达...
His标签是应用最广泛的标签，既可以用于纯化也可以用于检测，而且大多数情况不需要切除，加在N端存在提前终止翻译和无法终止翻译的可能，产生的副产物不利于分离纯化；加C端时存在次级翻译起始的可能，产生的副产物也不利于分离纯化，双端His有利于目标蛋白的准确检测与纯化，但可能影响酶的活性。纯化标签+检测标签 纯化...
表位标签 表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如Western Blot和免疫共沉淀。最常用的表位标签有His、Flag、HA等。 荧光标签 荧光标签可用于活细胞和死细胞检测,最常用的荧光蛋白包括绿色荧光蛋白(GFP)、橙色荧光蛋白(OFP)、红色荧光蛋白(RFP)和黄色荧光蛋白(YFP)。它们被广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达...
双标签系统:如His-Flag、GST-His组合,可串联不同纯化方法提高纯度。 标签切除:若需天然蛋白(如结构解析),需在标签与目标蛋白间插入蛋白酶切位点(如TEV、Thrombin)。 ��选择原则 His标签:经济高效,适合大规模纯化。 Strep标签:高特异性,但介质成本较高。 荧光标签(GFP/RFP):实时追踪,无需破坏样本。 蛋白...
GFP抗体-抗GFP标签抗体 常用的标签包括GFP、HA、Flag、His、GST等。其中绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein),简称GFP,这种蛋白质zui早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。 Myc抗体-抗Myc标签抗体 随着蛋白质组学...
● 大的蛋白质分子:GST(谷胱甘肽巯基转移酶)、SPA(葡萄球菌蛋白A)、GFP(绿色荧光蛋白)等。使用时会增加目标蛋白的溶解性,但在蛋白结晶和抗体生产的过程中,标签必须去除。 ● 小的多肽标签:6×His(六聚组氨酸)、HA(流感病毒血凝素表位)、c-myc(人c-myc蛋白表位)、Flag(...
常用的标签包括GFP、HA、Flag、His、GST等。其中绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein),简称GFP,这种蛋白质zui早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。
常见的分子量较小的标签有His-Tag、Flag-Tag、HA-Tag、Myc-Tag,这些标签只有几个氨基酸,有很多商品化的抗体,用这些Tag主要用来节省成本,也节约大家制备单抗所需的时间。而大分子的蛋白标签常见的有SUMO、GFP、GST等。 3、蛋白标签都需要去除吗? 一般为了不影响目的蛋白的后续应用,都会选择一定的方式将表达时带上...
His标签是当前最为热门的标签蛋白之一。His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签（HHHHHH，编号：184961），可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析（IMAC...
图2.碧云天Flag标签蛋白免疫沉淀试剂盒(磁珠法)用于GFP-Flag融合蛋白的免疫沉淀效果图。293T细胞(人胚肾细胞)转染GFP-Flag质粒36小时后,经Lysis Buffer裂解。样品1为Input,即全细胞裂解液(total cell lysate);样品2为BeyoMag™ Mouse IgG Magnetic Beads (小鼠IgG磁珠)免疫沉淀后经SDS-PAGE Sample Loading Buffer...