通常将GAPDH作为内参基因，用于评估各个上样孔内蛋白的总量的 consistency。若GAPDH的表达量在不同处理条件下变化不大，它可以作为加样量的对照。通过比较目的基因与GAPDH的表达量，可以调整目的基因的变化倍数，确保实验结果的准确性。
(3)Nicot N, Hausman J F, Hoffmann L, et al. Reference gene selection for RT-qPCRnormalization in potato during biotic and abiotic stress[J]. Journal of Experimental Botany, 2005, 56(421):2907-2914. 翌圣生物根据市场需求,研发出了具有高扩增效率、高特异性、高通用性的HieffTM qPCR SYBR Green ...
一般作为内参（样本的加样对照）。GAPDH不同，则说明加样量不同。目的基因的变化倍数要做相应的调整。
5. 接下来使用ChIP-PCR/qPCR和荧光素酶检测来鉴定FOXM1是否与GAPDH启动子中的结合位点结合。利用AnimalTFDB和Contra v3 web工具共预测4个TFBS，并设计相应的引物对(图8H)。半定量ChIP RT-PCR/qPCR分析显示，在H1299或MDA-MB-231细胞中，FOXM1主要结合在P2位点(图8I-L)。研究总结：本研究阐明了GAPDH在肿瘤调节...
PCR 方法一步法 RT-qPCR 反应速度标准 基因符号GADPH 内部探针修改TAMRA™ 淬灭剂 (3')、JOE (5') 标签或染料JOE 产品线TaqMan™ 产品类型实时荧光定量 PCR 试剂 数量100 reactions 运输条件干冰 种属人 足够用于100 次反应 靶标GAPDH 反应次数100 次反应 ...
4.为不同的qPCR仪器提供了被动参考染料 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双...
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异...
实时定量PCR(RT-qPCR) 目的:GAPDH基因常作为定量PCR实验的内参基因。 应用:用于标准化目标基因的表达数据。 技术要点与注意事项 抗体选择:选择针对人、小鼠或大鼠等不同物种的高特异性GAPDH抗体。 实验优化:针对不同的实验类型和样本特性,优化抗体的稀释比例和孵育条件。
PCR 方法两步法 RT-qPCR 基因符号GAPDH 环保功能绿色可持续包装 标签或染料VIC: 产品线TaqMan™,VIC™ 数量2500 reactions 运输条件室温 种属人 靶标GAPDH 适用于(应用)基因表达 浓度20X 反应次数2500 次反应 Unit SizeEach 内容与储存 对照引物探针套件 ...
在实验设计阶段,应该仔细考虑内参蛋白的选择,并根据实验条件和目的进行优化。如果可能,使用多个内参蛋白进行验证可以提高数据的可信度。此外,为了进一步验证结果的可靠性,可以包括未处理的对照组、不同处理时间点的样本以及使用不同方法(如RT-qPCR)来验证蛋白表达数据。