GAPDH作为RT-PCR中的内参基因,其原理主要基于以下几点:1. 高表达稳定性:GAPDH基因在大多数细胞中均高度表达,且其表达水平相对稳定,不易受实验条件、细胞类型或疾病状态的影响。这使得GAPDH成为一个理想的参照基因,用于标准化和比较不同样本之间的RNA表达数据。2. 基因保守性:GAPDH基因序列在进化上相...
一般认为一些持家基因的表达量在不同状态下变化不大,所以可以认为它们表达是恒定的,故而用来做内参简而言之,就是你有两个样品(譬如不同生长条件或者不同组织的),要比较其中某基因A表达转录变化,就分别比较两个样品中A相对于GAPDH的表达即可.譬如,如果第一个条件下A:GAPDH=2,在第二个条件下为4,那么在第二个条...
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。4 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。5.加样(样本处理区)6.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体...
因为GAPDH的基因表达量在是不同状态下是变化很小的,所以可以认为GAPDH表达是恒定的,所以可以选择它来做内参。
PCR 方法一步法 RT-qPCR 反应速度标准 基因符号GADPH 内部探针修改TAMRA™ 淬灭剂 (3')、JOE (5') 标签或染料JOE 产品线TaqMan™ 产品类型实时荧光定量 PCR 试剂 数量100 reactions 运输条件干冰 种属人 足够用于100 次反应 靶标GAPDH 反应次数100 次反应 ...
5. 接下来使用ChIP-PCR/qPCR和荧光素酶检测来鉴定FOXM1是否与GAPDH启动子中的结合位点结合。利用AnimalTFDB和Contra v3 web工具共预测4个TFBS,并设计相应的引物对(图8H)。半定量ChIP RT-PCR/qPCR分析显示,在H1299或MDA-MB-231细胞中,FOXM1主要结合在P2位点(图8I-L)。研究总结:本研究阐明了GAPDH在肿瘤调节...
TaqMan™ GAPDH 对照试剂可与 TaqMan™ 一步法 RT-PCR 预混液试剂、TaqMan™ EZ RT-PCR 核心试剂或者 TaqMan™ Gold RT-PCR 试剂联合用于一步法逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)。PCR 过程以及5'核酸酶过程受专利保护,该等专利归 Roche Molecular Systems, Inc.以及 F. Hoffmann-La Roche, Ltd. 所有...
没想到,我的所有实验操作视频中,播放冠军是RT-PCR(qPCR)。视频链接:https://www.bilibili.com/video/BV1kh411o7kM 我本来以为这个实验,各家出品逆转录和PCR试剂的公司,都有非常详尽的说明书,照着说明书一步一步的做下去,不会有什么问题的。 ---问题分割线--- 这几天,收集整理...
(3)Nicot N, Hausman J F, Hoffmann L, et al. Reference gene selection for RT-qPCRnormalization in potato during biotic and abiotic stress[J]. Journal of Experimental Botany, 2005, 56(421):2907-2914. 翌圣生物根据市场需求,研发出了具有高扩增效率、高特异性、高通用性的HieffTM qPCR SYBR Green...