组织特异性启动子(如叶片Cab启动子、根特异启动子)限制FLP酶在特定组织或发育阶段表达,避免全局性基因删除对生物体的毒性。 (2)操作流程(以植物转基因为例) 载体构建:将目标外源基因(如抗虫基因)两侧插入 同向FRT位点...
利用Cre/LoxP和来自酵母的Flp/FRT系统可以研究特定组织器官或特定细胞中靶基因灭活所导致的表型。通过常规基因打靶在基因组的靶位点上装上两个同向排列的loxp,并以此两侧装接上loxp的(loxP floxed)ES细胞产生“loxP floxed”小鼠。然后,通过将“loxP floxed”小鼠与Cre转基因鼠杂交(也可以用其他方式向小鼠中引入Cre重...
基因条件性敲除是一种在特定组织细胞或细胞发育的特定阶段对某一特定基因进行敲除或引入的技术,而Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是实现这一技术的常用方法。Cre/LoxP系统: 组成:由Cre重组酶和LoxP位点组成。 原理:Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列,介导基因序列的删除或重组。 特点:高效、特异性和灵...
从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的条件下具有良好的稳定性。该系统的另一个成分Flp识别位点(Flp recognition target,FRT)与loxP位点非常相似,同样由两个...
目前,Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列(LoxP位点),介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性,使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入,以研究其在特定组织或时间点的功能。
条件性基因敲除的基本原理 Flp / FRT 系统 该系统与Cre/loxP系统相同,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的...
10.3864/j.issn.0578-1752.2011.15.021 FLP/FRT 位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展 赵爱春,龙定沛,谭 兵,许龙霞,向仲怀 (西南大学蚕学与系统生物学研究所/农业部蚕学重点开放实验室,重庆 400716 ) 摘要:来源于酵母2 μm质粒的FLP/FRT 位点特异性重组系统已经被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、 ...
Flp-Frt系统FLP(flippase)也是一种位点特异DNA重组酶,类似于Cre,克隆自酿酒酵母,由423个氨基酸组成。Flp重组酶作用反向重复序列中两个长48 bp的FRT位点,一些FRT突变体也能被Flp识别,包括F3等,通常这些突变体只能与自身相同序列发生重组。Flp-Frt重组系统诱导基因重组的方式①当FRT在同一条DNA上且方向相同时,则两FRT...
在植物转基因植株产生过程中,对转化细胞进行抗性筛选是通用程序,转化细胞的抗性一般是抗生素抗性或除草剂抗性,将赋予转化细胞抗性的选择标记基因删除是提高转基因植物生物安全性的重要措施。来自于啤酒酵母的FLP/frt位点特异性重组系统可有效删除同向定点重组位点frt之间
7.1.1实验理论 FLP FRT重组系统与Mosaic杂交实验1是【北京大学】遗传学实验的第31集视频,该合集共计40集,视频收藏或关注UP主,及时了解更多相关视频内容。