位点特异性重组(site-specific recombination)技术是近 20 年来发展起来的一项重要的分子生物学技术,该系统主要是通过借助能够识别特异性位点的重组酶(site-specific recombinase,SSR),在基因组上对外源 DNA 进行操作,可以实现基因的置换、倒置和删除等。FLP/FRT 系统就属于位点特异性重组系统的一种。 FLP是一个重组酶...
7.1.1实验理论 FLP FRT重组系统与Mosaic杂交实验1是【北京大学】遗传学实验的第31集视频,该合集共计40集,视频收藏或关注UP主,及时了解更多相关视频内容。
答案便是借助Cre-LoxP或Flp-FRT等重组酶系统。 简单来说,这类重组酶系统是通过特异位点重组酶(Site-specific recombinases, SSRs)介导重组酶特异识别位点(Recombination tar-get sites, RTs)间的重组,来实现特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位等操作。由于该技术能够有效克服其他类型重组技术的非特异性...
目前，Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列（LoxP位点），介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性，使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入，以研究其在特定组织或时间点的功能。
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-LoxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT是Flp的识别位点,全长48bp,由3个13bp的反向回文序列和8bp的间隔序列共同...
Flp-In™ 系统的主要组分包括: •一种 Flp-In. 靶标位点载体 pFRT⁄lacZeo,用于产生含有整合 FRT 位点的宿主细胞系 • 含有与潮霉素抗性基因连接的 FRT 位点的表达质粒,用于在人巨细胞病毒 (CMV) 即刻早期增强子⁄启动子的控制下对表达目标基因的稳定细胞系进行 Flp 重组酶介导的整合和选择 ...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT是Flp的识别位点,全长48bp,由3个13bp的反向回文序列和8bp的间隔序列共同...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT...
在经过一系列挣扎之后,好不容易看懂了CRISPR/Cas9的原理,冷不丁冒出来一个(B)Cre/LoxP条件性敲除系统https://www.jianshu.com/p/ccae8b289cab,到今天,发现还有一个(C)FLP/FRT重组系统。 果然学习就跟人生一样,并不是我猜中了开头,没料到结尾,其实是开头也没猜对,过程更加意外,结尾至今还没看到。
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 Flp-FRT系统与Cre-loxP诱导基因重组的方式类似,这两个系统比较明显的区别是这个...