因此,Cre/loxP系统最适宜在动物体内使用。loxP和FRT位点的序列如图所示。 基于Cre/loxP系统建立的四环素诱导条件性基因敲除系统 该系统包含两个互补系统,分别为tTA依赖和rtTA依赖的基因敲除系统,现在又被称为Tet-Off(tTA依赖)系统和Tet-On(rtTA依赖)系统。在这两个系统中,四环素控制转录因子tTA或rtTA与启动子pTEC的...
除Cre-LoxP系统外,类似的还有与Cre-LoxP系统无交叉影响的vCre-vLoxP、sCre-sLoxP系统,及Flp-FRT/F5系统和Dre-Rox1/Rox2系统,对应的表达方案分别为fDIO和dDIO系统。 多套重组酶体系的存在为研究中设计多个限制条件提供了便利,灵活应用Cre、Flp、Dre重组酶系统将有助于更深入课题的开展。 1、Flp-FRT系统 Flp-FR...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-LoxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT是Flp的识别位点,全长48bp,由3个13bp的反向回文序列和8bp的间隔序列共同...
除Cre-LoxP系统外,类似的还有与Cre-LoxP系统无交叉影响的vCre-vLoxP、sCre-sLoxP系统,及Flp-FRT/F5系统和Dre-Rox1/Rox2系统,对应的表达方案分别为fDIO和dDIO系统。多套重组酶体系的存在为研究中设计多个限制条件提供了便利,灵活应用Cre、Flp、Dre重组酶系统将有助于更深入课题的开展。 1、Flp-FRT系统 Flp-FRT...
FLP是一个重组酶(flippase,Flp),类似于Cre,它识别的位点是FRT,当FRT在同一条DNA上且方向相同时,则两FRT位点之间的基因则被删除;FRT方向相反,则基因被倒转。 FRT:short flippase recognition target (FRT) 参考文献: 肖雪宾. FLP 重组酶表达载体的构建及其在 FLP/FRT 系统中的应用[D]. 吉林大学, 2012....
CreLoxP10-FlpFRT重组系统分类及基本原理 CreLoxP10-FlpFRT重组系统分类及基本原理 - 小恒学术于20240130发布在抖音,已经收获了2236个喜欢,来抖音,记录美好生活!
目前，Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列（LoxP位点），介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性，使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入，以研究其在特定组织或时间点的功能。
从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Flp发挥作用也不需要任何辅助因子,同时在不同的条件下具有良好的稳定性。该系统的另一个成分Flp识别位点(Flp recognition target,FRT)与loxP位点非常相似,同样由两个...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT...
Flp-In™ 系统的主要组分包括:•一种 Flp-In. 靶标位点载体 pFRT⁄lacZeo,用于产生含有整合 FRT 位点的宿主细胞系• 含有与潮霉素抗性基因连接的 FRT 位点的表达质粒,用于在人巨细胞病毒 (CMV) 即刻早期增强子⁄启动子的控制下对表达目标基因的稳定细胞系进行 Flp 重组酶介导的整合和选择• Flp 重组...