可控性:通过诱导条件或组织特异性启动子实现时空特异性删除。 安全性:删除筛选标记基因(如抗生素抗性基因),避免转基因生物的环境释放风险。残留的单一FRT位点无功能性,降低后续重组可能性(需避免载体设计中冗余FRT)。 ...
利用Cre/LoxP和来自酵母的Flp/FRT系统可以研究特定组织器官或特定细胞中靶基因灭活所导致的表型。通过常规基因打靶在基因组的靶位点上装上两个同向排列的loxp,并以此两侧装接上loxp的(loxP floxed)ES细胞产生“loxP floxed”小鼠。然后,通过将“loxP floxed”小鼠与Cre转基因鼠杂交(也可以用其他方式向小鼠中引入Cre重...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-LoxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT是Flp的识别位点,全长48bp,由3个13bp的反向回文序列和8bp的间隔序列共同...
FLP/FRT系统来源于酿酒酵母,FLP(Flippase)是一种重组酶,能识别特定的FRT(FLP Recombination Target)位点,并介导两个FRT位点之间的DNA序列发生重组。FRT位点是一段特定的DNA序列,通常由两个13bp的反向重复序列和中间8bp的核心序列组成,长度一般为34bp。 构建含目的基因及FRT位点的载体。 将目的基因克隆到一个特定的...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT是Flp的识别位点,全长48bp,由3个13bp的反向回文序列和8bp的间隔序列共同...
基因条件性敲除是一种在特定组织细胞或细胞发育的特定阶段对某一特定基因进行敲除或引入的技术,而Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是实现这一技术的常用方法。Cre/LoxP系统: 组成:由Cre重组酶和LoxP位点组成。 原理:Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列,介导基因序列的删除或重组。 特点:高效、特异性和...
1、Flp-FRT系统 Flp-FRT系统与Cre-loxP类似,也是由一个重组酶和一段特殊的DNA序列组成。其中,Flp(flippase recombination enzyme)重组酶,是从酵母细胞内被发现的,其基因全长1272bp,为48kDa大小的、由423个氨基酸组成的多肽单体蛋白。 FRT...
目前,Cre/LoxP、Flp/FRT重组系统是常用的条件性基因敲除方法。Cre/LoxP系统由Cre重组酶和LoxP位点组成。Cre重组酶能识别并切割特定的DNA序列(LoxP位点),介导基因序列的删除或重组。这一系统具有高效、特异性和灵活性,使研究人员能够对特定基因进行条件性敲除或敲入,以研究其在特定组织或时间点的功能。
7.1.1实验理论 FLP FRT重组系统与Mosaic杂交实验1是【北京大学】遗传学实验的第31集视频,该合集共计40集,视频收藏或关注UP主,及时了解更多相关视频内容。
关键词:FLP/FRT 系统;位点特异性重组;转基因;高等真核生物 Progress in Research of FLP/FRT Site-Specific Recombination System in Higher Eukaryotes ZHAO Ai-chun, LONG Ding-pei, TAN Bing, XU Long-xia, XIANG Zhong-huai (Institute of Sericulture and Systems Biology, Southwest University/Key Sericultur...