其中ChIP-Seq可以真实、完整地反映结合在DNA序列上的靶蛋白,是目前研究蛋白质-DNA互作的经典方法。 一、DNA-蛋白质互作——染色质状态和功能研究 在生物学研究中,DNA与蛋白质之间的互作(DNA-Protein Interactions,DPIs)是至关重要的,参与基因的表达、调控、复制、重组和修复以及RNA的转运、翻译和调控等多个过程,几乎...
DNA-蛋白质之间互作是依靠【 】 A. 识别螺旋上特异氨基酸与DNA上碱基间形成的氢键和范德华力 B. 靠碱基与氨基酸之间形成的堆积力 C. 分子间的范德华力 D. 碱基与氨基酸间的共价结合力 相关知识点: 试题来源: 解析 A.识别螺旋上特异氨基酸与DNA上碱基间形成的氢键和范德华力 ...
将核蛋白粗提物进行SDS-PAGE电泳分析, 转膜后与同位素标记的特异DNA序列探针结合, 位点特异性DNA结合蛋白借助于氢键、离子键和疏水键结合DNA探针, 从而可通过放射自显影对DNA结合蛋白进行定性、定量分析。
1. 电荷相互作用 DNA和蛋白质相互作用的一个基本原理是电荷相互吸引。DNA上的磷酸基团带负电荷,而大多数蛋白质中含有带正电荷的氨基酸残基,如赖氨酸、精氨酸等。通过这种静电吸引,在不同的物理条件下,蛋白质可以具体结合到DNA的双螺旋结构上,从而影响DNA的转录和复制等生命活动。2. 氢键相互作用 在DNA和...
DNA和蛋白质互作是生命体系中非常重要的一个环节。DNA是遗传信息的主要承载者,而蛋白质则是生命体系中的重要功能分子。两者之间的互作对于生命体系的正常运作是至关重要的。 在DNA和蛋白质互作中,DNA通过其序列信息决定了蛋白质的合成。具体来说,DNA中的基因序列被转录成为RNA,而RNA则被翻译成为蛋白质。这一过程中...
染色质免疫共沉淀基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法(抗体亲和)沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段,通过对目的片段的纯化与后期检测,从而获得蛋白质与DNA 相互作用的信息。
1ChIPChIP是研究DNA与蛋白互作的传统经典方法,需要将样本进行甲醛交联后再用超声设备进行片段化处理,之后利用特异性抗体进行靶向富集,将富集得到的DNA进行建库测序分析即得到靶向蛋白质互作的DNA信息。2CUT&TagCUT&Tag是研究DNA与蛋白互作的新型技术,利用转座酶对抗体靶向区域进行切割,将切割得到的DNA序列可以一步扩增...
真核生物基因组DNA以染色质形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达调控机制的基本途径。ChIP-seq是将染色质免疫沉淀技术(ChIP)与新一代测序技术(NGS)相结合[1],能够高效地在全基因组范围内检测与...
凝胶阻滞实验EMSA原理简介 凝胶阻滞(Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)实验是体外分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。其原理为蛋白质与核酸分子结合后将大大增加其相对分子质量,而凝…
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。近半个世纪以来, 前辈们在DNA-蛋白质复合物的构成和分解过程中进行了大量探索, 发展了一系列研究其互作关系的方法技术。 1.EMSA:凝胶迁移实验 ...