ChIP 的一般流程是:甲醛固定细胞---收集细胞,将染色质复合物中 DNA 切割---加入目的蛋白的抗体,与靶蛋白-DNA 复合物相互结合---加入Protein A 或 Protein G 微珠,结合抗体-靶蛋白-DNA 复合物并沉淀---对沉淀下来的复合物进行清洗,除去一些非特异性结合---洗脱,得到富集的靶蛋白-DNA 复合物---解交联,纯化...
在这篇文章中,我们将介绍蛋白质与DNA互作的四种方法。 1. DNA结合蛋白 DNA结合蛋白是一类能够与DNA结合的蛋白质,它们通过与DNA的特定序列结合来调控基因表达。这些蛋白质可以通过直接与DNA结合来阻止或促进转录因子的结合,从而影响基因的表达。例如,转录因子可以通过与DNA结合来激活或抑制基因的转录,从而影响细胞的功能...
下面介绍4种常见的蛋白质与DNA互作的方法。 1. DNA结合蛋白质 DNA结合蛋白质是特殊的蛋白质,它们能够通过与DNA的特定序列结合来实现一系列的生物学功能。这种DNA结合蛋白质具有可变的DNA结合域,这些域可以根据它们所处的生物环境而发生变化,从而使它们能够识别和结合具有特定序列的DNA。这种蛋白质与DNA的相互作用可以...
DNA-蛋白质之间互作是依靠【 】 A. 识别螺旋上特异氨基酸与DNA上碱基间形成的氢键和范德华力 B. 靠碱基与氨基酸之间形成的堆积力 C. 分子间的范德华力 D. 碱基与氨基酸间的共价结合力 相关知识点: 试题来源: 解析 A.识别螺旋上特异氨基酸与DNA上碱基间形成的氢键和范德华力 ...
DNA-蛋白质之间互作是依靠【 】 A. 蛋白质中的识别螺旋嵌入DNA小沟中 B. 蛋白质识别螺旋上特定氨基酸与DNA大沟中的碱基间特异接触 C. 蛋白质识别螺旋上的所有
1)、在DNA-蛋白质结合的反应体系中加入了超量的非标记的竞争DNA(competitor DNA),如果它同探针DNA结合的是同一种转录因子蛋白质,那么由于竞争DNA 与探针DNA相比是极大超量的,这样绝大部分转录因子蛋白质都会被竞争结合掉, 而使探针DNA仍然处于自由的非结合状态,可以在电泳凝胶的放射自显影图片上 就不会出现阻滞的...
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。近半个世纪以来, 前辈们在DNA-蛋白质复合物的构成和分解过程中进行了大量探索, 发展了一系列研究其互作关系的方法技术。 1.EMSA:凝胶迁移实验 ...
真核生物基因组DNA以染色质形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达调控机制的基本途径。ChIP-seq是将染色质免疫沉淀技术(ChIP)与新一代测序技术(NGS)相结合[1],能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白修饰、转录因子等互作的DNA区段。
真核生物基因组DNA以染色质形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达调控机制的基本途径。ChIP-seq是将染色质免疫沉淀技术(ChIP)与新一代测序技术(NGS)相结合[1],能够高效地在全基因组范围内检测与...
蛋白质与DNA互作是基因转录调控的关键,也是启动基因转录的前提。蛋白质与DNA互作主要包括组蛋白、转录因子、DNA甲基化酶和染色质重塑复合物等。为了研究蛋白质-DNA互作,科学家发明了很多方法:凝胶阻滞、DNaseⅠ足迹实验、甲基化干扰、体内足迹、酵母杂交、ChIP-Seq等。其中ChIP-Seq可以真实、完整地反映结合在DNA序列上的...