转录抑制(CRISPRi):通过将 dCas9 与序列特异性 sgRNA 配对,dCas9-sgRNA 复合物可以结合至转录起始位点(TSS)附近,通过物理性阻断 RNA 聚合酶 (Pol) 与靶标DNA结合来干扰靶标基因的转录延伸,还可以通过破坏转录因子的结合来阻碍转录起始,达到基因沉默或减少基因转录的效果。为了进一步提高转录抑制的效率,dCas9可融合...
再将多个代谢途径酶与SpyTag短肽相融合,从而形成(酶-SpyTag):(SpyCatcher-dCas9)复合体,该复合体在不同sgRNA的引导下,能够以模块化的方式将每种酶引导到DNA模板上的特定位置。 研究人员首先利用荧光蛋白验证了目标蛋白在DNA支架上纳米范围内的可编程定位,随后将紫色杆菌素生物合成途径的五种酶以不同的方式组装在一...
1月27日,清华大学化工系生物育种技术与装备团队在《核酸研究》(Nucleic Acids Research)发表文章,采用高通量手段系统研究了sgRNA与靶标DNA错配效应对dCas9结合活性的影响。 近年来,作为可编程的DNA靶向工具,CRISPR/(d)Cas系统在基因编辑、高通量遗传筛选、染色体成像、合成基因路线构建、新型抗菌药物和体外核酸检测等领...
CRISPR/Cas9系统,是由识别模板的sgRNA以及切割蛋白的Cas9组成,来造成DNA切口,随后通过自身非同源末端链接(NHEJ)和同源重组(HR)实现基因编辑。 sgRNA决定了CRISPR/Cas9基因编辑实验的成败,而传统的sgRNA设计网站虽然有很多,但设计过程繁琐,且得到的sgRNA还...
在猪胎儿成纤维中,PX459-cas9-sgRNA2质粒的打靶效率为15.67%,Cas9/sgRNA2体系的打靶效率为33.33%。[结论]Cas9/sgRNA体系较PX459-cas9-sgRNA质粒打靶效率提高了约1倍,这对提高猪体细胞的基因编辑效率和促进基因编辑在猪上的应用有重要意...
The present invention relates to a method for quantitatively regulating gene expression in bacteria by regulating the binding between sgRNA and dCas9. Since the degree of transcriptional repression can be precisely controlled using the sgRNA of the present invention, transcription without direct ...
Cas9 sgRNA的设计原则包括以下几个方面: 1.评分:优先挑选高评分靶点。 2.碱基序列:Spcas9为20bp+NGG;Sacas9为21bp+NNGRRT。同时,应避免出现连续4个及以上的T,这是终止信号。 3.GC含量:GC含量应在40%~60%之间。 4.靶点位置:必须设计在CDS区,设计在独立外显子,尽量靠近蛋白N端(编码区前三分之一)。不应...
Imaging systems that allow visualization of specific loci and nuclear structures are highly relevant for investigating how organizational changes within the nucleus play a role in regulating gene expression and other cellular processes. Here we present a
CRISPR/Cas9-mediated genome editing efficiently creates specific mutations at multiple loci using one sgRNA in Brassica napus CRISPR/Cas9 is a valuable tool for both basic and applied research that has been widely applied to different plant species. Nonetheless, a systematical assessment of the efficie...
基于Cas9-sgRNA的病毒LTR免疫沉淀筛选调控病毒转录靶标专利信息由爱企查专利频道提供,基于Cas9-sgRNA的病毒LTR免疫沉淀筛选调控病毒转录靶标说明:本发明公开了基于Cas9‑sgRNA的病毒LTR免疫沉淀筛选调控病毒转录靶标的方法和应用。本发...专利查询请上爱企查