研究团队成功开发了一种高精准Cas13d变体（hpCas13d），该变体通过三个氨基酸替代显著降低了附带的RNA酶活性，并能特异性地解决导致HCM的多种人类MYH7病理序列变异。体外实验验证了hpCas13d的高精准度和低附带切割活性，为后续的体内实验打下了坚实的基础。图1：高精度Cas13d的结构定向进化（A. 双荧光选择系统示意...
通过使用腺病毒相关病毒血清型9(AAV9)将hpCas13d特异性地传递到心肌细胞中,研究团队在体内模型中评估了hpCas13d的治疗潜力。 图2:体外分裂和鉴别窗口的探索(A、B:Myh6-R872H[A]和Myh6-wt[B] 在不同浓度的Cas13d变体作用下的体外...
Gene W. Yeo(左),段文贞(右) 在这项最新研究中,段文贞团队在亨廷顿症小鼠模型上进行了进一步研究,他们发现,腺相关病毒 (AAV) 递送的RNA靶向的CRISPR-Cas13d疗法能够有效改善亨廷顿症小鼠模型的运动协调能力,减缓大脑纹状体退化,并降低了毒性蛋白水平。这种改善持续了至少8个月,没有发现不良反应,而且对其他RNA的脱...
研究发现,CRISPR-Cas13d可以被优化以特异性地靶向C9orf72-ALS病人细胞中的GGGGCC重复RNA,并显著减少源自GGGGCC重复RNA的多聚二肽重复蛋白的翻译。 在这项研究中,研究人员首先构建了绿色荧光蛋白报告系统并比较了Cas13b和Cas13d靶向GGGGCC...
CRISPR/Cas13d系统的工作原理:CRISPR/Cas13d系统是由Cas13d蛋白和sgRNA组成的复合物,其中Cas13d蛋白是一种能够切割单链RNA(ssRNA)的核酸酶,而sgRNA是一种能够与Cas13d蛋白结合并指导其识别目标RNA的短片段RNA。Cas13d蛋白由四个功能域组成,分别是N端结合域(NBD)、核酸识别域(NRD)、催化域1(CTD1)和催化域2...
为了克服最先进的T细胞基因组工程技术带来的局限性,我们提出了多路复用效应导数组(MEGA),这是一个使用CRISPR-Cas13d进行转录组调节的多功能平台。Cas13d是一种紧凑的CRISPR效应器,具有RNA引导的RNA内切酶活性。与Cas9不同,Cas13d不结合或切割DNA。相反,它与含有可编程的∼23-核苷酸垫片的CRISPR相关RNA(crRNA)复合...
云序生物MeRIP-seq助力华中农业大学棉花遗传改良团队金双侠教授团队在Advanced science期刊(IF=14.3)发表题为“CRISPR/dCas13(Rx) Derived RNA N6-methyladenosine (m6A) Dynamic Modification in Plant”的研究论文。该研究构建了基于 CRISPR/dCas13 (Rx) 的可编程 m6A 编辑工具,用于棉花中相关转录本的编辑,以GhECA1...
1、分析题图:CRISPR/Cas13d技术是一项以向导RNA(gRNA)引导Cas13d蛋白定向作用于靶向RNA的新兴技术,该技术可将病毒RNA基因组切割形成RNA片段。 2、RNA的基本单位是核糖核苷酸,DNA的基本单位是脱氧核苷酸。 【详解】 A、由图可知,gRNA与靶向RNA中特定序列能通过碱基互补配对形成RNA-RNA杂合双链,然后将Cas13d蛋白引导...
大千世界,微生物无处不在,CRISPR自然也是多种多样。为了鉴定Cas13d酶,Salk生物研究所和Arbor Biotechnologies公司(张锋是创始人之一)的研究人员通过常用的生物信息学筛选,在推定的效应核酸酶附近寻找CRISPR重复序列。 他们鉴定出的Cas13d蛋白与之前发现的Cas13a-c同源物的序列相似度不高,但含有Cas13超家族特有的HEPN核...
CRISPR/Cas13d技术是一项以向导RNA(gRNA)引导Cas13d蛋白定向作用于靶向RNA的新兴技术。研究人员设计了若干个gRNA,分别靶向新冠病毒RNA基因组的不同肽编码区,但不影响人体细胞的RNA,作用机理如图所示。下列相关叙述正确的是( ) A. Cas13d蛋白能切割含有gRNA的核糖核苷酸链 B. Cas13d蛋白与限制酶作用的底物和化学键...