根据结果图信息，首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用；并且二者都没有带标签，因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体；然后Input组为阳性对照，IgG为IP组的阴性对照，anti-FOXP1是IP的实验组，即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示，Iuput组中均检测到了B...
非特异性结合，IgG是阴性对照，就是为了排除，你的目的蛋白和抗体是非特异性结合
IP组的第一个条带表示利用IgG进行沉淀实验,结果蛋白X与蛋白Y没有被沉淀下来,说明蛋白X、蛋白Y不能与IgG结合(阴性对照,用于排除蛋白与抗体非特异性结合的可能性);IP组的第二条带表示利用蛋白X进行沉淀实验,结果蛋白X被沉淀下来,蛋白Y也被沉淀下来,由此得到结论:蛋白X-蛋白Y之间存在相互作用。 Co-IP和GST pull-...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和F...
如果实在没有合适的抗体,至少应在目的条带的信号相较于杂带足够强的情况下进行后续实验,否则无法保证最终结果的可靠性。🎯 IP后WB: 一次完整严谨的Co-IP实验应包含IgG对照组、IP实验组以及Input组。 Input泳道所点的样本与IP前WB一致,作为阳性对照。 Co-IP实验成功的标准是能够在IP泳道检测到诱饵蛋白信号,且...
由对照组的条带可以得到结论:蛋白X与蛋白Y都是存在的。IP组的个条带表示利用IgG进行沉淀实验,结果蛋白X与蛋白Y没有被沉淀下来,说明蛋白X、蛋白Y不能与IgG结合(阴性对照,用于排除蛋白与抗体非特异性结合的可能性);IP组的第二条带表示利用蛋白X进行沉淀实验,结果蛋白X被沉淀下来,蛋白Y也被沉淀下来,由此得到结论:...
结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和FOXP1,表明样本存在这两种蛋白;IP组中的IgG组未显示条带,排除非特异性结合的可能,而anti-FOXP1组在BRD9和FOXP1的条带位置中均显示,即沉淀复合物中存在这两种蛋白,证明BRD9和FOXP1之间存在相互作用。 案例二:(目的蛋白融合标签进行Co-IP验证) 图3 UHRF2和PRDX1之间...
结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和FOXP1,表明样本存在这两种蛋白;IP组中的IgG组未显示条带,排除非特异性结合的可能,而anti-FOXP1组在BRD9和FOXP1的条带位置中均显示,即沉淀复合物中存在这两种蛋白,证明BRD9和FOXP1之间存在相互作用。 案例二:(目的蛋白融合标签进行Co-IP验证)...
IgG:这个是阴性对照,磁珠里加的 IgG 不会拉到任何蛋白,所以是阴性对照。 案例分析 📈举个例子吧,有个实验是验证蛋白 EDR1 和蛋白 EDR4 之间是否存在相互作用。实验中,EDR4 带有 GDP 标签,EDR1 带有 FLAG 标签。实验分为两组:第一组有 GFP 标签和 EDR1-FLAG 蛋白,第二组有 EDR4-GFP 蛋白和 EDR1-FLA...
由对照组的条带可以得到结论:蛋白X与蛋白Y都是存在的。IP组的第一个条带表示利用IgG进行沉淀实验,结果蛋白X与蛋白Y没有被沉淀下来,说明蛋白X、蛋白Y不能与IgG结合(阴性对照,用于排除蛋白与抗体非特异性结合的可能性);IP组的第二条带表示利用蛋白X进行沉淀实验,结果蛋白X被沉淀下来,蛋白Y也被沉淀下来。