我们继续看IP部分:2组(IgG组)结果显示,蛋白A与蛋白B均没有条带,说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来,证明蛋白A和B与IgG没有结合,同时排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性;而实验组蛋白A和B均有条带,表示利用蛋白A的抗体进行免疫沉淀,富集了蛋白A,同时蛋白B也被拉下来,即提示我们蛋白A和蛋白B可形成复合...
3. 上清,50µl+50µl 2×电泳上样缓冲液作input;余下各取一半加IgG与目的蛋白抗体(2µl),4℃过夜或者2-3h。 4. 加珠子30-40µl,1h,NP-40洗4-5次 (IP抗体的孵育条件和珠子的孵育条件可根据实际优化,非特异性较多可抗体孵育2h,珠子1.5h,若是结合较少则需延长时间,提高IP抗体的量也可以增加成...