根据结果图信息，首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用；并且二者都没有带标签，因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体；然后Input组为阳性对照，IgG为IP组的阴性对照，anti-FOXP1是IP的实验组，即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示，Iuput组中均检测到了B...
本实验一共分为两大组：Input组及IP组，其中IP组又分为IgG组（阴性对照组）和实验组，并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。由Input组的条带可以得到结论：蛋白A与蛋白B都是存在的，证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验，结果蛋白A与蛋白B均没有条带...
“IP:Flag IB:Flag”这一步也是为了明确免疫沉淀特异性识别并利用磁珠/凝胶富集蛋白A的实验过程是成功的。 当然我们也有小伙伴选择以下分组方式 本实验一共分为两大组:Input部分及IP部分。 其中IP组又分为IgG组(阴性对照组)和实验组,并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。 由Input组得到结论:蛋白A与...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和F...
(2)不含IgG对照组的形式: 单质粒转染的Co-IP(内源性蛋白A的抗体拉外源性标签蛋白B): 案例如下:转染HA-Ub质粒,然后用内源性的PKM2抗体去拉HA-ub,从而证明PKM2能够被泛素化。 实验设计分为2部分,1. 是看whole cell lysate(简写WCL)目的是为了证明内源性的蛋白是表达的,同时转染的HA-Ub质粒也是表达的。通常...
Preimmune:阴性对照,IgG组 anti-TBP/TDF:实验组,IP组 【补充】重链/轻链污染该如何选择抗体? IP检测产生轻重链原因: 完整抗体=2条重链(~55KD/重链)+2条轻链(~25KD/轻链),抗体变性后,就会产生一个55KD的重链蛋白,1个25KD的轻链蛋白,WB检测IP的样本时,由于二抗也识别结合一抗的轻重链,导致WB曝光时会产生对...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和...
结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和FOXP1,表明样本存在这两种蛋白;IP组中的IgG组未显示条带,排除非特异性结合的可能,而anti-FOXP1组在BRD9和FOXP1的条带位置中均显示,即沉淀复合物中存在这两种蛋白,证明BRD9和FOXP1之间存在相互作用。 案例二:(目的蛋白融合标签进行Co-IP验证)...
IP组的第一个条带表示利用IgG进行沉淀实验,结果蛋白X与蛋白Y没有被沉淀下来,说明蛋白X、蛋白Y不能与IgG结合(阴性对照,用于排除蛋白与抗体非特异性结合的可能性);IP组的第二条带表示利用蛋白X进行沉淀实验,结果蛋白X被沉淀下来,蛋白Y也被沉淀下来,由此得到结论:蛋白X-蛋白Y之间存在相互作用。 Co-IP和GST pull-...
结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和FOXP1,表明样本存在这两种蛋白;IP组中的IgG组未显示条带,排除非特异性结合的可能,而anti-FOXP1组在BRD9和FOXP1的条带位置中均显示,即沉淀复合物中存在这两种蛋白,证明BRD9和FOXP1之间存在相互作用。 案例二:(目的蛋白融合标签进行Co-IP验证) 图3 UHRF2和PRDX1之间...