与IP抗体同源同型(亚型)的抗体:如 Rabbit IgG;Mouse IgG1, etc; 取与IP实验等量的裂解液,使用Isotype Control孵育;与IP抗体孵育同时进行。 Isotype Control选择: 预纯化的目的: 减少裂解混合物中的非特异性蛋白的含量。 同时减少了可能与Protein A/G发生交叉反应的蛋白含量。 根据IP实验结果,可以调整每次IP的总...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了B...
与IP抗体同源同型(亚型)的抗体:如 Rabbit IgG;Mouse IgG1, etc; 取与IP实验等量的裂解液,使用Isotype Control孵育;与IP抗体孵育同时进行。 Isotype Control选择: 预纯化的目的: 减少裂解混合物中的非特异性蛋白的含量。 同时减少了可能与Protein A/G发生交叉反应的蛋白含量。 根据IP实验结果,可以调整每次IP的总...
本实验一共分为两大组:Input组及IP组,其中IP组又分为IgG组(阴性对照组)和实验组,并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。由Input组的条带可以得到结论:蛋白A与蛋白B都是存在的,证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验,结果蛋白A与蛋白B均没有条带...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和...
IP样本一般建议新鲜制备并立即使用,如有需要可保存在-80 ℃。 2)预纯化 阴性对照的选择: 与IP抗体同源同型(亚型)的抗体:如 Rabbit IgG;Mouse IgG1, etc; 取与IP实验等量的裂解液,使用Isotype Control孵育;与IP抗体孵育同时进行。 Isotype Control选择: ...
在co-ip-ms实验中,IgG对照是一种常用的实验对照。IgG是一种免疫球蛋白,与目标蛋白质无特异性结合。因此,将IgG作为对照可以帮助我们判断实验结果是否受到非特异性结合的影响。五、为什么需要IgG对照?在co-ip-ms实验中,我们常常需要确定目标蛋白质与其他蛋白质的特异性相互作用。然而,由于实验条件的复杂性和蛋白...
根据结果图信息,首先从最左边的一列可以知道该结果是探讨BRD9和FOXP1之间是否存在相互作用;并且二者都没有带标签,因此IB检测直接用针对目的蛋白的抗体;然后Input组为阳性对照,IgG为IP组的阴性对照,anti-FOXP1是IP的实验组,即表示分别用IgG和FOXP1的抗体进行WB检测蛋白复合物。结果显示,Iuput组中均检测到了BRD9和...
“IP:Flag IB:Flag”这一步也是为了明确免疫沉淀特异性识别并利用磁珠/凝胶富集蛋白A的实验过程是成功的。 当然我们也有小伙伴选择以下分组方式 本实验一共分为两大组:Input部分及IP部分。 其中IP组又分为IgG组(阴性对照组)和实验组,并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。