非特异性条带要分情况分析，如果是input和IP组、IgG组都有杂带，可能是磁珠的非特异性结合，样本上样量过高、或者抗体浓度过高造成的非特异性结合，建议实验前对磁珠进行漂洗，实验过程中增加洗涤次数，使用合适的样品和抗体浓度。如果IgG组和IP组无杂带，Input有杂带，可能由于WB抗体的特异性不够好，实际实验
由Input组的条带可以得到结论：蛋白A与蛋白B都是存在的，证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验，结果蛋白A与蛋白B均没有条带，说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来，证明蛋白A和B与IgG没有结合，排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性；而实验组蛋白A和B均有条...
非特异性条带要分情况分析,如果是input和IP组、IgG组都有杂带,可能是磁珠的非特异性结合,样本上样量过高、或者抗体浓度过高造成的非特异性结合,建议实验前对磁珠进行漂洗,实验过程中增加洗涤次数,使用合适的样品和抗体浓度。如果IgG组和IP组无杂带,Input有杂带,可能由于WB抗体的特异性不够好,实际实验中可能考虑的...
若有条带,则说明存在交互;若无条带,则说明不存在交互。📌 在典型的COIP结果图中,input代表细胞裂解液,其中包含所有成分,因此用抗体检测时会有信号。IgG作为阴性对照,不会沉淀到目标蛋白。🔄 关键实验结果是:用目标蛋白A的抗体沉淀的样品中检测到B的存在(上半图),或用目标蛋白B的抗体沉淀的样品中检测到A的存...
由Input组的条带可以得到结论:蛋白A与蛋白B都是存在的,证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验,结果蛋白A与蛋白B均没有条带,说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来,证明蛋白A和B与IgG没有结合,排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性;而实验组蛋白A和B均有条带,...
我们继续看IP部分:2组(IgG组)结果显示,蛋白A与蛋白B均没有条带,说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来,证明蛋白A和B与IgG没有结合,同时排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性;而实验组蛋白A和B均有条带,表示利用蛋白A的抗体进行免疫沉淀,富集了蛋白A,同时蛋白B也被拉下来,即提示我们蛋白A和蛋白B可形成复合...
由Input组的条带可以得到结论:蛋白A与蛋白B都是存在的,证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验,结果蛋白A与蛋白B均没有条带,说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来,证明蛋白A和B与IgG没有结合,排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性;而实验组蛋白A和B均有条带,...
回答:在实际操作的过程中很难避免一些非特异性条带,要看条带的位置,如果条带位置正好是抗体轻重链,且该位置在 input 组没有,IP 组有,是有可能的。可以通过多次漂洗,使用磁珠代替琼脂糖等办法,看看是否可以改善现有问题。 问题:请问跑出来 Ig...
IgG组,阴性对照。非特异性的IgG抗体,一般不会拉下什么东西下来,也就一般不会有条带。如果有条带说明目的蛋白与beads本身有结合或与IgG有非特异性结合,需要重新完善下方法。 条带图片上方FBW7和YTHDF2分别用FBW7或YTHDF2抗体来做免疫沉淀。 左边的是使用什么抗体来做的IB/WB。也就是用IB/WB来表现免疫共沉淀的...
由Input组的条带可以得到结论:蛋白A与蛋白B都是存在的,证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验,结果蛋白A与蛋白B均没有条带,说明利用IgG抗体没有把蛋白A和B沉淀下来,证明蛋白A和B与IgG没有结合,排除了蛋白与抗体非特异性结合的可能性;而实验组蛋白A和B均有条带,...