在car-t技术的实施中,最为关键的是慢病毒载体的构建,尽管慢病毒载体的研究有了很大进展,但距离临床应用还有很长的路要走。例如,重组病毒的滴度还不够高,除naldini等报道的结果外,其余均在103tu/ml～104tu/ml之间,难以达到体内应用的需要。造成重组病毒滴度低的主要原因之一是慢病毒的启动子表达强度大,在t细胞中...
摘要:本发明提供了一种CAR‑T治疗载体及其构建方法和应用。该CAR‑T治疗载体,包括AXL scFv;所述AXL scFv包括依次连接的AXL单链抗体轻链可变区,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示;linker接头,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示;AXL单链抗体重链可变区,其氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。构建的CAR‑T治疗载体能够很...
在本发明的第二方面,提供一种上述car-t治疗载体的构建方法,包括以下步骤:(1)将如seqidno.1所示的含氨苄青霉素抗性基因ampr序列、如seqidno.2所示的原核复制子pucori序列、如seqidno.3所示的病毒复制子sv40ori序列、用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件、如seqidno.11所示的zsgreen1绿色荧光蛋白、如seqidno.12...
本发明公开了一种用于制备CAR‑T的慢病毒载体质粒及其制备方法和用途,含有双启动子;酶切位点充足,易于插入基因;含有T2A序列,T2A序列能使连接的两个基因同时表达;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体,酶切位点充足,组件丰富,易于改造,方便载体的构建;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体应用广泛,可用于构建单...
用于在结肠癌治疗中应用的CAR-T载体的制备及其构建方法专利信息由爱企查专利频道提供,用于在结肠癌治疗中应用的CAR-T载体的制备及其构建方法说明:本发明提供了一种用于在结肠癌治疗中应用的CAR‑T载体的制备及其构建方法。本发明的治疗载体由慢...专利查询请上爱企查
摘要 本发明公开了用于CAR‑T制备的慢病毒载体及其构建方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明还建立了荧光定量PCR检测病毒滴度的方法,为临床应用提供了检测标准。本发明提供的慢病毒载体具有长度小,能够高效表达CAR基因,包装出足够滴度的慢病毒、而且不表达GFP等与治疗无关的标志基因等优点,经实验验证,该慢病毒载体...
摘要 本发明公开了一种CAR‑T毒性指示细胞的快速构建方法,包括以下步骤:首先,构建序列为SEQ NO:1的慢病毒质粒;其次,慢病毒质粒大提,病毒包装制备得到慢病毒;再次,慢病毒感染常用细胞X;最后,将一种或几种生物素化处理的蛋白A加入到通用细胞U中,与U细胞膜上的avidin紧密结合,得到CAR‑T毒性指示细胞;本发明的CA...
针对肝癌相关抗原DLK1为靶点的CAR-T构建方法专利信息由爱企查专利频道提供,针对肝癌相关抗原DLK1为靶点的CAR-T构建方法说明:本发明公开了针对肝癌相关抗原DLK1为靶点的CAR‑T构建方法。本发明选择肝癌相关抗原DLK1...专利查询请上爱企查
一种T淋巴细胞白血病的CAR-T治疗载体及其构建方法和应用专利信息由爱企查专利频道提供,一种T淋巴细胞白血病的CAR-T治疗载体及其构建方法和应用说明:本发明公开了一种T淋巴细胞白血病的CAR‑T治疗载体,包括慢病毒骨架质粒、人EF1α启动子、C...专利查询请上爱企查
摘要 本发明公开了用于CAR‑T细胞制备的慢病毒载体及其构建方法和在制备抗肿瘤细胞制品中的应用,同时本发明还建立了荧光定量PCR检测病毒滴度的方法,为临床应用提供了检测标准。本发明提供的慢病毒载体具有长度小,在T细胞中能够稳定、高效表达CAR基因,在病毒包装细胞如HEK293T中可以包装出高滴度的慢病毒、不含GFP、Neomy...