1.本发明属于生物细胞技术领域,特别是涉及一种能同时表达cd19 car 和敲除t细胞表面pd-1表达的质粒结构。 背景技术: 2.car-t(chimeric antigen receptor t-cell immunotherapy,嵌合抗原受体 t细胞免疫疗法)是近年来发展起来的新的过继免疫细胞治疗手段,通过基因工程手段修饰t细胞,使其表达嵌合抗原受体,嵌合抗原受体可以...
摘要 本发明公开了一种能同时表达CD19CAR和敲除T细胞表面PD‑1表达的质粒结构及构建方法,在PD‑1的基因序列中选取23个碱基序列作为靶点,构建pGL3‑gRNA‑cas9‑U6‑PD‑1质粒,所述碱基序列为SEQ ID:agccg aagac cttag agcag tag。本发明利用Crispr/Cas9系统,敲除T细胞中的PD‑1基因,使其不表...
摘要 本发明涉及一种能同时表达CD19CAR和敲低T细胞表面PD‑1表达的质粒结构,包括依次串联的H1启动子、由H1启动子启动的抗PD‑1shRNA序列、EF1α启动子以及由EF1α启动子启动的三代CD19CAR序列;所述三代CD19CAR序列由CD19单链可变区、人CD8α铰链区、人CD28跨膜区和胞内区、人41BB胞内区、以及人CD3...
所述三代CD19CAR序列由CD19单链可变区,人CD8α铰链区,人CD28跨膜区和胞内区,人41BB胞内区,以及人CD3ζ胞内区串联构成.本发明所提供的质粒结构,将其用慢病毒转导进T细胞,比采用CRISPR/Cas9敲除PD1在生产CART细胞的工艺上简化了很大一步;并且这些CART细胞在体外受到抗原刺激后表现出了杀肿瘤细胞毒性的增强,细胞...
本发明涉及一种能同时表达CD19CAR和敲低T细胞表面PD1表达的质粒结构,包括依次串联的H1启动子,由H1启动子启动的抗PD1shRNA序列,EF1α启动子以及由EF1α启动子启动的三代CD19CAR序列;所述三代CD19CAR序列由CD19单链可变区,人CD8α铰链区,人CD28跨膜区和胞内区,人41BB胞内区,以及人CD3ζ胞内区串联构成.本发明...
本发明公开了一种能同时表达CD19CAR和敲除T细胞表面PD1表达的质粒结构及构建方法,在PD1的基因序列中选取23个碱基序列作为靶点,构建pGL3gRNAcas9U6PD1质粒,所述碱基序列为SEQ ID:agccg aagac cttag agcag tag.本发明利用Crispr/Cas9系统,敲除T细胞中的PD1基因,使其不表达PD1蛋白,打开免疫系统的刹车闸,增强免疫系统...