诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 03 诱导分化过程 01 细胞长满以后,接触抑制2天(目的是让细胞退出生长周期); 图1. 细胞接触抑制 02 加入含有IBMX(使用浓度为0.5mM)、地塞米松(使用浓度为1μmol/L)、胰岛素(使用浓度为1-10μg/mL)的培养液培养2天; 图2. 加诱导培养...
培养基:3T3-L1细胞最适宜的培养基是DMEM高糖+10%小牛血清。在进行成脂诱导实验时,可以添加不同的成脂诱导剂和抑制剂来控制细胞分化过程。 传代:3T3-L1细胞的传代次数应该控制在10次以内,否则会影响细胞的生长和分化。在进行传代时,需要注意细胞的消化过程,细胞对胰酶比较敏感,添加胰酶后约1分钟内细胞会脱落,因此消...
在实际操作中，首先需要将70-80%密度的3T3-L1细胞消化分散，转移到新的培养瓶中，使用富含糖的DMEM培养基，保持37℃恒温培养，每2-3天更换一次培养基。成脂诱导阶段，通常在72小时后移除成脂诱导剂，用含10% FBS的DMEM培养基替代，让细胞稳定为脂肪样细胞状态，至少5天以上。为了评估成脂过程，可以...
1.接种诱导细胞:取对数生长期的细胞,按照2×10^4cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度90-100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 2. 细胞分化诱导:于37℃,5%CO2培养环境下培养约3天,更换为成脂诱导分化培养基诱导液,培养1天后,再更换为成脂诱导分化...
分子筛 其它纳米材料 类石墨烯 无机纳米材料 金属纳米材料 纳米颗粒 纳米棒 纳米线 化学合成 分子砌块 金属材料 PEG衍生物 技术服务 客户服务 资源支持 下载中心 最新活动 关于我们 当前位置: 首页 细胞生物学 细胞培养与消化 细胞培养基 3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞) 成脂诱导分化...
3T3-L1细胞分化为脂肪细胞样细胞 在6 孔板中接种细胞,接种密度为每平方厘米 3 x 103个细胞。 让细胞在 DMEM 中生长至汇合度为 70%,每 2 - 3 天更换一次培养基。分化前,汇合度不应超过 70%,因为这样会增加分化后的细胞死亡。 开始分化时,去除 DMEM,并在每个孔内加入 2–3 mL MDI 诱导培养基(第0天...
1. 在诱导分化前转染：这种方法适用于需要在细胞尚未分化之前引入外源基因或干扰RNA的情况。通过转染前的...
完全培养基配置 DMEM培养基;10%小牛血清;1%双抗 简介3T3-L1是从3T3细胞( Swissalbino )中经克隆分离得到的连续传代的亚系。该细胞从快速分裂到汇合和接触性抑制 状态经历了前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。该细胞鼠痘-病毒阴性;可产生甘油三酯 ,高浓度血清可增强细胞内脂肪 堆积。
(1)3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素(INS)、地塞米松(DEX)和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤(IBMX)的诱导下,基因选择性表达,分化为成熟脂肪细胞,因此经过三种物质诱导的3T3-L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型.(2)3T3-L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外,还需加入一定量的动物血清(可换成抗生素以防止污染),并...