3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞)是通过克隆分离得到的3T3(swiss小白鼠)的连续亚株。当3T3-L1细胞从快速分裂到长满接触抑制时,该细胞经过前脂肪向脂肪样逆转。3T3-L1细胞可用于研究糖尿病,肥胖症等。 本期细胞学堂,普诺赛将为大家带来3T3-L1细胞基础信息、培养注意事项、诱导分化过程及注意事项。 01 基础信息
（1）3T3-L1分化能力下降可能与过度传代有关，建议使用低代次（P15以内）细胞，另外血清批次差异也会影响分化能力，建议使用新鲜血清或验证过的优质FBS，分化前需让细胞达到接触抑制，即融合2天后诱导；（2）3T3-L1细胞贴壁不良，可能的原因是过渡消化及培养皿未包被，需要缩短胰酶的作用时间至2分钟内，使用胶原酶（...
【细胞简介】3T3-L1是从小鼠胚胎中分离出来的成纤维细胞，当3T3-L1细胞从快速分裂到长满接触抑制时，该细胞经过前脂肪向脂肪样逆转，该细胞可用于研究糖尿病、肥胖症等疾病。【细胞特点】【细胞培养建议】该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若...
诱导步骤：将融合后的3T3-L1（汇合度100%）细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h，之后每隔一天更换常规新鲜培养基，一般第九天染色。PS：不同产品活性纯度不同，浓度...
细胞简介: 3T3-L1细胞是通过克隆3T3(swiss小鼠)细胞得到的连续亚株，细胞表达胰岛素。当3T3-L1细胞从快速分裂到长满且接触抑制时，细胞从前脂肪向脂肪样逆转。高血清含量的培养液可以促进3T3-L1细胞内脂肪的积累。3T3-L1细胞可用于研究与糖尿病、肥胖和相关疾病相关的基本细胞机制。检测表明，3T3-L1细胞鼠痘病毒呈...
PS:清洗细胞时动摇要轻柔,防止脂滴脱落,油红O工作液一定要过滤至无沉淀,否则染色后有残渣且较难冲洗!!! “鸡尾酒”诱导策略进击版 有研究者探索了葡萄糖浓度和诱导液2(含10mg/mL胰岛素的低糖培养基)的作用时间对3T3L1细胞成脂分化率的影响,结果显示,低糖培养基诱导时成熟脂肪细胞形成率明显增高,诱导液2作用时间...
诱导步骤:将融合后的3T3-L1(汇合度100%)细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h,之后每隔一天更换常规新鲜培养基,一般第九天染色。
诱导步骤:将融合后的3T3-L1(汇合度100%)细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h,之后每隔一天更换常规新鲜培养基,一般第九天染色。
3先在外面过滤培养基,0.45um的滤膜过滤一遍,0.22um的滤膜再过滤一遍。 4再将培养基纳入超菌台中,用事先灭菌的过滤器过滤一遍(两层0.22um滤膜),过滤完后装入500mL试剂瓶中,4度保存。 P.S.1 3T3-L1细胞培养时用含10%NBS的培养基,诱导时用含10%FBS的培养基。 2过滤时可先过滤含NBS的培养基,再过滤含FBS的培...
3T3-L1细胞培养注意事项 细胞密度:细胞密度是影响3T3-L1细胞分化的重要因素,过低或过高的细胞密度都会影响分化效果;密度一般控制在90%的汇合度,如果太低,则会影响细胞生长和分化,如果太高,则会导致细胞死亡和分化受阻。 培养基:3T3-L1细胞最适宜的培养基是DMEM高糖+10%新生牛血清。 传代:3T3-L1细胞的传代次数应该...