1.成脂诱导分化操作1.1 接种干细胞取对数生长期3T3-L1的细胞，按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿，于37℃，5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。NOTE：如细胞贴壁性较差，建议使用 0.1%明胶对培养底 面进行包被。1.2 细胞分化诱导于37℃，5%CO₂...
● 3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞卷边飘起; ● 细胞代数越多,成脂能力越弱,需要诱导的时间也就越长,可适当增加地塞米松和胰岛素用量; ● 实验中所使用的溶剂遵循现用现配的原则。 ●参考文献● [1] Zebisch K , ...
3T3-L1细胞诱导 一、诱导液配制 1、4,3-异丁基-1-甲基黄嘌呤溶液（IBMX）配制。分子量222，几乎不溶于水，现配现用，0.22um过滤除菌。100×母液（50mmol/L）：11.5mg IBMX+940ul超纯水+60ul 1mol/L KOH。2、胰岛素溶液配制。比较难溶，-20℃保存1个月，使用PH 2~3的稀盐酸溶液助溶，0.22um过滤...
其诱导分化的原理是通过连续培养和控制细胞外环境,使细胞经历特定的分化过程。 首先,3T3-L1细胞会被培养在含有高营养的培养基中,其中含有高浓度的葡萄糖和羊血清。这一步骤有助于细胞增殖和发育。接下来,在细胞生长至达到密度的时候,减少培养基中营养物的浓度,同时添加较低浓度的羊血清。这种改变细胞外环境的操作有...
4度保存3T3-L1前脂肪细胞株的诱导和分化1)将3T3-L1前脂肪细胞接种在培养板上,用含10%小牛血清的高糖DMEM培养液在37和5% CO2下培养;2)在细胞生长至80-90%并融合2天后(融合是指允许细胞接触并抑制,即细胞在完全生长后再生长2天),加入含有0.5毫升/升IBMX(储存液浓度0.5毫升/升)、1毫升/升(储存液浓度1毫克...
3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞) 成脂诱导分化培养基具体成交价以合同协议为准 公司名称 北京索莱宝科技有限公司 品牌 型号 产地 厂商性质 生产厂家 更新时间 2024/8/31 18:56:36 访问次数 164 在线交流 发送询价 进入商铺 同类产品 联系方式:索莱宝17801761073 联系我们时请说明是化工仪器网上看到...
细胞分化小鼠目的 建立小鼠3T3-L1前脂肪细胞的培养及诱导分化为成熟脂肪细胞的方法.方法 使用含10%胎牛血清(FBS)的高糖达氏修正伊氏培养基(DMEM)-F12液体培养基在体积分数5%二氧化碳(CO2),37℃条件下常规培养 3T3-L1细胞,2～3 d换液1次;诱导分化培养基Ⅰ培养2d,诱导分化培养基Ⅱ培养2d;基础培养基培养4～6 d...
细胞分化的诱导方法 3.1 诱导分化的条件 3T3-L1细胞的分化过程是复杂的,可通过添加不同的化学物质来诱导。下面介绍几种常用的诱导方法: (1)MDI法:将3T3-L1细胞培养至达到密度要求后,加入诱导剂混合液,即3-isobutyl-1-methylxanthine(IBMX)、dexamethasone和insulin。IBMX是一种磷酸酶抑制剂,可增加cAMP水平,促进三...
3T3-L1脂肪细胞胰岛素信号蛋白胰岛素抵抗受体胰岛素观察3T3-L1脂肪细胞长期暴露到高浓度葡萄糖对糖的转运活动和胰岛素信号蛋白的表达及磷酸化的影响。结果表明 ,在 3T3 -L1脂肪细胞中高浓度葡萄糖 (10 ,15和 2 5mmol·L-1)培养 2 4h ,以一种剂量依赖的方式诱导基础的和胰岛素刺激的糖转运活动的减少。高糖降低了...
3T3-L1细胞的诱导分化,在前两天的融合期的时候,确定你用的是DMEM高糖+小牛血清,在细胞高度融合以后才能开始进行第一阶段的诱导(MDI诱导,DMEM高糖+胎牛血清),第一阶段后,细胞中可以观察到细胞已经开始变圆,第二阶段的诱导(insulin诱导,DMEM 高糖+胎牛血清),细胞中就可以观察到脂肪滴,进入第三个阶段的诱导的时候,...