细胞密度:细胞密度是影响3T3-L1细胞分化的重要因素,过低或过高的细胞密度都会影响分化效果;密度一般控制在60-80%的汇合度,如果太低,则会影响细胞生长和分化,如果太高,则会导致细胞死亡和分化受阻。 培养基:3T3-L1细胞最适宜的培养基是DMEM高糖+10%小牛血清。在进行成脂诱导实验时,可以添加不同的成脂诱导剂和抑制...
其诱导分化的原理是通过连续培养和控制细胞外环境,使细胞经历特定的分化过程。 首先,3T3-L1细胞会被培养在含有高营养的培养基中,其中含有高浓度的葡萄糖和羊血清。这一步骤有助于细胞增殖和发育。接下来,在细胞生长至达到密度的时候,减少培养基中营养物的浓度,同时添加较低浓度的羊血清。这种改变细胞外环境的操作有...
诱导步骤：将融合后的3T3-L1（汇合度100%）细胞从DMEM生长培养基切换到含有0.5mmol/L IBMX(abs817348)、10mg/mL胰岛素和1μmol/L地塞米松的分化培养基中48h。然后将细胞维持在含有10%FBS和10 mg/mL胰岛素的DMEM培养基中48h，之后每隔一天更换常规新鲜培养基，一般第九天染色。PS：不同产品活性纯度不同，浓度...
3T3-L1前脂肪细胞株的诱导分化 1)将3T3-L1前脂肪细胞接种于培养板,用含10%小牛血清的高糖DMEM培液在37℃、5%CO2培养; 2)待细胞长满至80-90%,融合2天(融合的意思是指让细胞接触抑制,就是长满后换液让其再长两天)后,加含终浓度为0.5mmol/L IBMX(储存液浓度0.5mmol/L)、终浓度为1umol/L(储存液浓度为...
本产品可用于 3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色。特点优势诱导分化程序简单便捷成脂诱导效率高质量控制本产品已经过无菌检测、 pH 测试、渗透压检测、内毒素检测。声明：本产品供科学研究和生产使用，用于组织和细胞的体外培养；禁止临床使用。诱导分化完全培养基液的配制方法1.配制前将特级胎牛血清及成脂诱导添加物放置...
细胞分化的诱导方法 3.1 诱导分化的条件 3T3-L1细胞的分化过程是复杂的,可通过添加不同的化学物质来诱导。下面介绍几种常用的诱导方法: (1)MDI法:将3T3-L1细胞培养至达到密度要求后,加入诱导剂混合液,即3-isobutyl-1-methylxanthine(IBMX)、dexamethasone和insulin。IBMX是一种磷酸酶抑制剂,可增加cAMP水平,促进三...
三:3t3-l1诱导分化过程整体较为顺利,之前考虑到的诸如细胞可能贴壁不牢,易漂浮的情况基本未出现(漂浮很少),诱导剂配置过程中由于剂量极低,担心的浓度不准问题,后证明对分化影响不是很大。 一、诱导液配制 1、4,3-异丁基-1-甲基黄嘌呤溶液(IBMX)配制。分子量222,几乎不溶于水,现配现用,0.22um过滤除菌。100...
液一次,诱导分化8-12天3T3-L1细胞90%多呈成熟脂肪细胞表型,可用 于实验。 诱导操作注意事项: 1、一共需诱导3次,每次诱导的时间点最好固定,保证诱导剂作用够48h,若 时间冲突诱导的时间只可延长,不可短于48h。 2、诱导操作需注意:以6孔板为例,每孔3ml培液,一个6孔板需18ml培 ...
阶段的诱导的时候,脂肪滴的聚集更加明显。诱导剂如地塞米松是需要乙醇溶解的, IBMX 是在一定浓度的 KOH 溶解 的,insulin 是在一定浓度的 HCL 中溶解的,诱导分化 的程度也和细胞有关,同为 3T3-L1 细胞,但是每种细胞的分化能力有很大的差异,在 没有进入 分化诱导的时候,一定不能用胎牛血清来养细胞!在分化期有...
4度保存3T3-L1前脂肪细胞株的诱导和分化1)将3T3-L1前脂肪细胞接种在培养板上,用含10%小牛血清的高糖DMEM培养液在37和5% CO2下培养;2)在细胞生长至80-90%并融合2天后(融合是指允许细胞接触并抑制,即细胞在完全生长后再生长2天),加入含有0.5毫升/升IBMX(储存液浓度0.5毫升/升)、1毫升/升(储存液浓度1毫克...