蔗糖酶酶解所生成的还原糖与3,5-二硝基水杨酸反应而生成橙色的3-氨基-5-硝基水杨酸。颜色深度与还原糖量相关,因而可用测定还原糖量来表示蔗糖酶的活性。 二、试剂 1)酶促反应试剂: 基质8%蔗糖; pH5.5磷酸缓冲液:1/15M磷酸氢二钠(11.876gNa2HPO4·2H2O溶于1L蒸馏水中)0.5ml加1/15M磷酸二氢钾(9.078gKH2PO...
土壤蔗糖酶测定(比色法) 1. 方法选择及原理 蔗糖酶能酶促蔗糖水解生成葡萄糖和果糖.蔗糖酶活性的测定方法有用酶学的方法测量所产生的葡萄糖(滴定法或重量法)或是根据蔗糖的非还原性,用生成物(葡萄糖和果糖... 分析总结。 蔗糖酶活性的测定方法有用酶学的方法测量所产生的葡萄糖滴定法或重量法或是根据蔗糖的非...
水杨酸配制方法比色法测定土壤蔗糖酶活性时,要用到3,5-二硝基水杨酸溶液,但是由于实验用的化学纯水杨酸是粉末的,而且是用2N的氢氧化纳溶解,所以每次配出来的都是浑浊的~不
实验五3,5-二硝基水杨酸比色法测定蔗糖酶的活力 实验目的： 掌握3,5二硝基水杨酸测定还原糖的基本原理和操作方法掌握酶的活力测定及其计算方法 实验原理： 蔗糖酶是一种水解酶，它催化蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。葡萄糖和果糖分别带有自由醛基和酮基，为还原糖。 蔗糖酶活力的大小与产生...
土壤蔗糖酶活性测定(3,5-二硝基水杨酸比色法)一、原理蔗糖酶与土壤许多因子有相关性,如与土壤有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度有关,一般情况下,土壤肥力越高,蔗糖酶活性越高。蔗糖酶酶解所生成的还原糖与3,5-二硝基水杨酸反应而生成橙色的3-氨基-5-硝基水杨酸。颜色深度与还原糖量相关,因而可用测...
还原糖的测定有多种方法,例如:纳尔逊,索模吉(Nelson-Smogyi)试剂比色法,斐林试剂法等。本实验采用3.5,二硝基水杨酸法测定还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5,二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。因此可利用分光光度计在500...
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也可根据蔗糖水解的生成物与某种物质(3,5-二硝基水杨酸或磷酸铜)生成有色化合物进行比色测定。还有一种方法,根据蔗糖液酶促反应前后光偏振面的变化(旋光法)进行测定。 目前,我国常用的主要是硫代硫酸钠滴定法,它是测定土壤蔗糖酶活性的经典方法。3,5-二硝基水杨酸比色法重现性较好,且手续较简便,适于成批样品...
DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关，而对还原糖的种类...