筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养:复苏HEK-293T细胞,用合适的培养基(如DMEM高糖培养基,含 10%胎牛血清等)在37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。2. 确定G418筛选浓度:如客户所做,在96孔板中接种细胞,设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度...
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
2.细胞活力:G418浓度越高,细胞活力越低。在低浓度G418(如0.25 mg/ml)下,细胞活力较高,细胞形...
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
1. 筛选前准备:在筛选前,需要将293T细胞接种到含有G418的培养基中。为了提高筛选效率,可以先将细胞接种到含有较低浓度G418的培养基中,然后逐渐提高浓度。此外,可以预先在培养基中加入适量的抗生素,如庆大霉素或卡那霉素,以防止污染。 2. 筛选过程:在含有G418的培养基中,细胞可能会出现不同程度的损伤。为了减轻细...
1. 筛选前准备:在筛选前,需要将293T细胞接种到含有G418的培养基中。为了提高筛选效率,可以先将细胞接种到含有较低浓度G418的培养基中,然后逐渐提高浓度。此外,可以预先在培养基中加入适量的抗生素,如庆大霉素或卡那霉素,以防止污染。 2. 筛选过程:在含有G418的培养基中,细胞可能会出现不同程度的损伤。为了减轻细...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养:复苏HEK-293T细胞,用合适的培养基(如DMEM高糖培养基,含 10%胎牛血清等)在37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。 2. 确定G418筛选浓度:如客户所做,在96孔板中接种细胞,设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度,用CCK...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养:复苏HEK-293T细胞,用合适的培养基(如DMEM高糖培养基,含 10%胎牛血清等)在37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。 2. 确定G418筛选浓度:如客户所做,在96孔板中接种细胞,设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度,用CCK...
293细胞加压G418多大浓度比较合适,单克隆的时候在96孔板里也要用G418嘛,多大浓度合适呢 通常G418筛选293细胞用药400-1000ug/ml。不过你最好在筛选之前做一个细胞耐药曲线,观察你用293细胞对不同浓度G418的耐受性。最高浓度要超过1000ug/ml,最低浓度要低于400ug/ml,甚至