筛选浓度确定：293T 细胞对 G418 较为敏感，筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间，但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板，每孔铺适量且等量 293T 细胞（约 5×10⁵个 /mL），待细胞贴壁、状态良好（24 小时后），分别加入含不同浓度 G418（如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL）...
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养：复苏HEK-293T细胞，用合适的培养基（如DMEM高糖培养基，含 10%胎牛血清等）在37℃、5% CO₂培养箱中培养，待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。2. 确定G418筛选浓度：如客户所做，在96孔板中接种细胞，设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度...
2.细胞活力：G418浓度越高，细胞活力越低。在低浓度G418（如0.25 mg/ml）下，细胞活力较高，细胞形...
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养:复苏HEK-293T细胞,用合适的培养基(如DMEM高糖培养基,含 10%胎牛血清等)在37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。 2. 确定G418筛选浓度:如客户所做,在96孔板中接种细胞,设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度,用CCK...
使用G418筛选HEK-293T细胞的详细步骤 1. 细胞培养:复苏HEK-293T细胞,用合适的培养基(如DMEM高糖培养基,含 10%胎牛血清等)在37℃、5% CO₂培养箱中培养,待细胞汇合度达80%-90% 时进行传代或转染操作。 2. 确定G418筛选浓度:如客户所做,在96孔板中接种细胞,设置 0 - 1100 μg/mL的G418浓度梯度,用CCK...
1.细胞生长:在较低的G418浓度下(如0.25 mg/ml),293T细胞能够正常生长,细胞密度逐渐增加,形态保持良好。随着G418浓度的增加(如0.5 mg/ml),细胞生长速度开始减慢,细胞密度增加缓慢。当G418浓度达到1 mg/ml时,部分细胞开始死亡,细胞密度明显下降。继续增加G418浓度(如2 mg/ml),细胞死亡更加严重,细胞密度降低。
293细胞加压G418多大浓度比较合适,单克隆的时候在96孔板里也要用G418嘛,多大浓度合适呢 通常G418筛选293细胞用药400-1000ug/ml。不过你最好在筛选之前做一个细胞耐药曲线,观察你用293细胞对不同浓度G418的耐受性。最高浓度要超过1000ug/ml,最低浓度要低于400ug/ml,甚至
不过你最好在筛选之前做一个细胞耐药曲线，观察你用293细胞对不同浓度G418的耐受性。最高浓度要超过1000ug/ml，最低浓度要低于400ug/ml，甚至可以到0。以确定至少需要多大浓度的G418能把293全部杀死，然后用这个浓度G418进行正式筛选。有这样的耐药曲线，你后面的实验会省很多事情。