4.细胞抗性:G418浓度越高,细胞抗性越强。在低浓度G418下,细胞对G418的敏感性较高,细胞容易死亡。随着G418浓度的增加,细胞逐渐产生抗性,细胞存活率提高。在高浓度G418下,细胞抗性达到顶点,细胞能够抵抗高浓度的G418毒性。 所以,对于293T细胞,G418的筛选浓度通常在1-2 mg/ml之间。这个浓度可以
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
2.细胞活力:G418浓度越高,细胞活力越低。在低浓度G418(如0.25 mg/ml)下,细胞活力较高,细胞形...
筛选浓度确定:293T 细胞对 G418 较为敏感,筛选浓度多在 200 - 800μg/mL 区间,但最适配浓度需预实验摸索。准备多组六孔板,每孔铺适量且等量 293T 细胞(约 5×10⁵个 /mL),待细胞贴壁、状态良好(24 小时后),分别加入含不同浓度 G418(如 200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL)的完全培养...
所以,对于293T细胞,G418的筛选浓度通常在1-2 mg/ml之间。这个浓度可以根据实验需求进行调整。一般来说,筛选浓度越高,筛选效果越好,但同时也会对细胞造成一定的损伤。因此,在选择筛选浓度时,需要根据实验目的和细胞耐受性进行权衡。在实际操作中,可以先从较低浓度开始,如0.5 mg/ml,观察细胞生长情况,逐渐增加浓度,直...