2–∆∆Ct 是一种计算实时荧光定量PCR(qPCR)时候计算样品中某个基因的相对表达量的方法。该法由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年设计,已经被广泛使用。 Ct值代表了样品的循环阈值,这是在跑荧光定量PCR的时候,机器反馈给你的一个数值。真正的含义是PCR过程中产物扩增出现的荧光信号达到了设定的阈值之后,...
方差分析，T检验均是对比差异性的方法。对于T检验的X来讲，其只能为2个类别比如男和女。如果X为3个...
qPCR的相对定量计算方式，即2–∆∆Ct方法，由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年提出并广泛应用。此方法在实时荧光定量PCR（qPCR）实验中，用于计算样品中特定基因相对于参考基因的相对表达量。荧光定量PCR实验中，仪器会根据扩增产物的荧光信号达到设定阈值的循环数来记录Ct值。Ct值的高低...
目的 探究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate, S1P)、1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1-phosphate receptor 2, S1PR2)在急性主动脉夹层(acute aortic dissection, AAD)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC...
1.2.6 数据分析 在每个处理时间点,RNAi 试验中 以 Nuclease-free water 组为对照,2-TD 胁迫试验中以 0 mg/g 组为对照,用 2-∆∆Ct 法计算 FoxAl 和 CYP6B6 的相对表达量.运用 Prism 8.0 软件进行统计分析 : RNAi 试验,在每个时间点进行 t 检验(Student's t test);2-TD 胁迫试验,在每个时间点...
PCR反应程序:95 ℃ 30 s;95 ℃ 5 s,60 ℃30s,45个循环。mRNA的相对转录量采用2-∆∆Ct方法计算,并以β⁃actin为内参基因。 1.5免疫组织化学检测 选取小鼠感染后第5 d试验的肺组织进行免疫组化。组织按常规方法制片,厚度4...
( real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)分析 RT-PCR 检测风险预测基因在模型组结肠黏膜 组织与正常组结肠黏膜组织中的表达水平.使用 TRIzol 试剂提取总 RNA 进行逆转录;使用 TBgreen (RR420)染料按照 10 μL 体系进行循环扩增,引物 序列见表 1.通过 2−∆∆Ct 方法测定基因相对表达量...
采用 Trizol 法提取 组织中的总 RNA,取 500 ng RNA 逆转录为 cDNA (Takara,RR036A);使用 TB green(Takara,RR420) 染料按照 10 μL 体系进行 45 次循环的扩增,引物序 列如表 1 所示 , 以 3- 磷酸甘油醛脱氢酶 (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH) 为内参,按 2−∆∆Ct 法分析.从...
方法：对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组（HMGB2 siRNA组），分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA 寡核苷酸（RNA oligo）和敲除HMGB2序列的RNA oligo。采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平，分别采用细胞划痕实验和...