2–∆∆Ct 是一种计算实时荧光定量PCR(qPCR)时候计算样品中某个基因的相对表达量的方法。该法由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年设计,已经被广泛使用。Ct值代表了样品的循环阈值,这是在跑荧光定量PCR的时候,机器反馈给你的一个数值。真正的含义是PCR过程中产物扩增出现的荧光信号达到了设定
在每20μL的反应中,使用PowerUp SYBR Green Master Mix(Thermo Fisher Scientific,A25778)通过定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)扩增10ng cDNA,并使用7500快速实时PCR系统(应用生物系统)测定mRNA表达。用△Ct法将mRNA水平标准化为甘油醛3-磷酸...
可以识别每孔样本名和基因名,与加样的位置无关。输入数据需要有至少三列,Sample、Detector、Ct,分别...