RNA 转染是将 RNA 导入细胞的经典转染技术的分支。RNA 转染的目的与质粒转染相似。将 mRNA 导入细胞旨在表达编码蛋白以及研究基因功能和调控。siRNA 用于评估基因敲低影响的 RNAi 研究。这两种方法的一个主要区别是 RNA 只能进行瞬时转染。 RNAi 工作流程 下图描绘了 siRNA 设计和合成...
不同类型的转染试剂其转染原理和适用范围各不相同,对 RNA 转染效率的影响也存在差异。例如,阳离子脂质体转染试剂通过静电作用与带负电的 RNA 结合形成复合物,然后通过内吞作用进入细胞;而聚合物转染试剂则依靠其与 RNA 形成的纳米颗粒来实现细胞摄取。某些转染试剂可能对特定...
RNA 的浓度对转染效率有直接影响。过高或过低的 RNA 浓度都可能导致不理想的转染结果。当 RNA 浓度过高时,可能会引起转染试剂的饱和,导致部分 RNA 无法与转染试剂有效结合,同时还可能增加细胞毒性;而 RNA 浓度过低则可能无法达到有效转染所需的剂量,影响基因表达的调控效果。RNA 的纯度也是至关重要的。含有杂质(...
RNA转染是将RNA分子导入到细胞中的一种实验技术,它通过研究人员将特定的RNA分子,例如:miRNA或siRNA,导入到细胞中,用来研究RNA分子在细胞内的作用机制与功能。这一技术在生物学领域有着广泛的应用,本文将对RNA转染试剂的原理、Polyplus转染试剂的优点以及应用这三个方面进行深入的探讨。RNA转染的原理:将RNA(miRNA...
既然都是核酸,传统的DNA转染方法都可以用来转染RNA,不过最头疼的就是RNA容易降解和防止RNAse污染。 RNA操作要注意的事项我们就不用罗嗦了,转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,你也要想到人家做质粒DNA转染时往往不会这么小心,难免...
(一)RNA 质量 纯度:高纯度的 RNA 是确保转染效率的基础。RNA 样本中若含有蛋白质、DNA、有机溶剂等杂质,会影响转染试剂与 RNA 的结合以及后续进入细胞的过程。例如,残留的 DNA 可能与 RNA 竞争转染试剂,导致有效转染复合物的形成减少。完整性:完整的 RNA 分子结构对于其在细胞内的稳定性和功能发挥至关重要...
RNA转染实验效率低下的缘由可以从多个方面进行分析,以下是一些主要因素:一、RNA质量与结构问题 RNA纯度:RNA样本中若含有蛋白质、DNA、有机溶剂等杂质,会显著影响转染效率。例如,蛋白质杂质可能与RNA竞争转染试剂的结合位点,从而减少有效转染复合物的形成;DNA杂质则可能干扰RNA与细胞内受体的相互作用,导致转染过程...
血清的质量和浓度也会影响转染效果,一般来说,较低的血清浓度(如 2% - 5%)可能有助于提高转染效率,但同时也可能影响细胞的生长和活性,需要进行平衡和优化。在实验前,应对培养基和血清进行预热处理,以减少温度对细胞的刺激。(二)RNA 准备 RNA 质量:高质量的 RNA 是转染成功的关键。使用无 RNase 的试剂...
细胞转染是DNA转染更好还是RNA更好,细胞DNA转染与RNA转染在多个方面存在显著的区别,需要根据各方面结合判断。 关于DNA转染与RNA转染 DNA转染 DNA转染是指将外源DNA分子导入真核细胞的过程,使真核细胞获得新的表型。它通常用于基因表达和蛋白质合成的研究,以及长期观察基因对细胞功能的影响和蛋白之间的相互作用。