RNAi转染方法及注意事项 RNAi的转染方法主要有三种：脂质转染、电转和病毒载体转导。脂质转染 脂质体（Iiposome）作为体内和体外输送载体的工具，已经研究的十分广泛。具有长疏水链头部带正电荷基团的阳离子脂质体与带负电荷的siRNA相互作用，在脂双分子层环绕siRNA，siRNA经过内吞被导入细胞。脂质转染适用大部分细胞，但...
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RNAi的转染方法主要有三种:脂质转染、电转和病毒载体转导。 脂质转染 脂质体(Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛。具有长疏水链头部带正电荷基团的阳离子脂质体与带负电荷的siRNA相互作用,在脂双分子层环绕siRNA,siRNA经过内吞被导入细胞。脂质转染适用大部分细胞,但在原代细胞及非分裂细胞总转...
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快速生长的粘附细胞(A549, Hela)siRNA或Stealth RNAi™ siRNA的脂质体转染RNAi载体的脂质体转染或腺病毒输送RNAi载体的脂质体转染或慢病毒输送 快速生长的悬浮细胞(THP-1)siRNA或Stealth RNAi™ siRNA的脂质体转染或电转RNAi载体的脂质体转染或腺病毒输送RNAi载体的脂质体转染或电转,或慢病毒输送 ...
1. 细胞状态选择：在进行RNAi转染之前，需要选择合适的细胞状态。通常情况下，处于对数生长期的细胞状态最佳，因为此时细胞的分裂和代谢能力较强，有利于siRNA的转染和基因沉默效果的发挥。2. 转染试剂选择：选择合适的转染试剂对于RNAi转染至关重要。常用的转染试剂包括lipofectamine、polybrene、electroporation等，根据不同...
RNAi(RNA干扰)是近年来生命科学领域的研究热点。在RNAi研究中,siRNA(小干扰RNA)的转染是关键步骤。虽然有多种方法可以进行siRNA转染,但最常用的是使用转染试剂。然而,有时候即使使用了转染试剂,siRNA也无法有效地进入细胞,导致RNAi效果不佳,这就是所谓的“劣效转染”。劣...
RNAi效应可在mRNA水平和蛋白质水平上体现,也可能影响细胞形态等生理学特征。 第二部分 RNAi实验具体设计 1. 需要短期抑制还是长效抑制? 1周以内:采用siRNA较好,无需构建载体,节省时间,并可通过两次转染的方法延长RNAi作用时间至2周。 2周以上:采用shRNA表达载体较好,因为效应持续时间较长。
在细胞RNAi转染的过程中，需要满足以下条件：1.选择合适的细胞系：不同的细胞系具有不同的转染效率和对转染条件的敏感性。因此，在转染之前，需要选择适合的细胞系，以便获得更高的转染效率和更好的实验结果。2.确定最佳的转染试剂：转染试剂是实现细胞转染的关键因素之一，不同的转染试剂具有不同的转染效率和毒性。...
RNAi的转染方法主要有三种:脂质转染、电转和病毒载体转导。 脂质转染 脂质体(Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛。具有长疏水链头部带正电荷基团的阳离子脂质体与带负电荷的siRNA相互作用,在脂双分子层环绕siRNA,siRNA经过内吞被导入细胞。脂质转染适用大部分细胞,但在原代细胞及非分裂细胞总转...