在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强,比色杯不洗干净会影响光吸收值,不可用石英怀测定...
在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合反应十分迅速,2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1 h内保持稳定。此法灵敏度高(比斐林一酚法还高4倍),易于操作,干扰物质少,是一种比较好的定量法...
染色 蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,是一种常用的微量蛋白质快速测定...
考马斯亮蓝G-250染色法是一种常用的蛋白质定量方法,具有灵敏度高、操作简便、结果准确可靠等优点。该方法基于蛋白质与染料考马斯亮蓝G-250之间的特异性结合,通过比色法可实现对蛋白质的定量检测。试验原理 蛋白质与染料的结合 考马斯亮蓝G-250是一种阴离子染料,在酸性条件下可与蛋白质中的碱性氨基酸(如精...
该反应快速灵敏(灵敏度比FolIn-酚法还高4倍)、易于操作、干扰物质少(考马斯亮蓝G-250和蛋白质通过范德华力结合,受蛋白质的特异性影响较小,除组蛋白外,其他不同种类蛋白质染色强度差异不大),可测定微克级蛋白质含量,是一种比较好的蛋白质定量法。但此方法也存在其缺点,考马斯亮蓝在蛋白质含量很高时线性关系...
考马斯亮蓝G250染色法测定啤酒中蛋白质含量
内容提示: 实验三实验三 蛋白质含量的测定蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝考马斯亮蓝 G250 染色法染色法) 原原 理理 考马斯亮蓝 G250 测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝 G250 在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色,前者最大光吸收在 465nm,后者在 595nm。在一定蛋白质浓度范围内(...
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一、实验目的:掌握考马斯亮蓝G-250测量Pr含量的测定 二、实验原理:考马斯亮蓝G-250测量Pr含量属于染料结合法的一种,该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与Pr的疏水区结合后变为青色。前者最大光吸收在465nm,后者在595nm.在一定Pr浓度范围内(1-100ug),Pr与色素结合物在595nm波长下的吸光度与...