考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量应该注意什么/ 答案 1.大量的去污剂如TritonX-100、SDS等严重干扰测定.2.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合的反应十分迅速,在2min左右反应达到平衡;其结合物在室温下1h内保持稳定.因此测定时,不可放置太长时间,否则将使测定结果偏低.相关推荐 1考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量应该注意...
解析 蛋白质所测的OD值一定要位于标准曲线范围内,因为G-250的曲线随着蛋白浓度增高有些略微偏离线性,若蛋白质浓度太高,可适当稀释后再测.此外,用于标准样品的牛血清白蛋白组分V最好现配现用,已经配好的溶液即使是-20°保存一段时间后也会造成你的结果偏高. ...
蛋白质所测的OD值一定要位于标准曲线范围内，因为G-250的曲线随着蛋白浓度增高有些略微偏离线性，若蛋白质浓度太高，可适当稀释后再测。此外，用于标准样品的牛血清白蛋白组分V最好现配现用，已经配好的溶液即使是-20度保存一段时间后也会造成你的结果偏高。
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法的优点是：1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；2.其结合物在室温下1h内保持稳定。3.该法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,00...
考马斯亮蓝G 250法具有简单、快速、准确的特点。它不需要复杂的操作步骤,适合大规模的蛋白质含量测定。 2. 确定标准曲线的方法 在实验中,我们可以使用蛋白质溶液来制备一系列的标准样品。根据各个标准样品的吸光度和已知的蛋白质浓度,可以绘制标准曲线。在实际操作中,要控制各个步骤的操作条件,如混合时间、孵育温度等...
考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质的含量一般测定范围在0-1000mg/l,所以要把你做的豆芽匀浆的蛋白质含量控制在此范围内才能测定准确，样品吸光度在0.2-0.6范围内较理想.
1. 灵敏度高：考马斯亮蓝 G-250 法对蛋白质的检测灵敏度高，能够准确测定含量较低的蛋白质样品。2. 快速简便：该方法操作简单，只需几个步骤即可完成测定，节省时间和实验操作成本。3. 延展性好：考马斯亮蓝 G-250 法适用于多种类型的蛋白质样品，包括纯化的蛋白质和复杂的混合物，具有很好的适应...
实验四 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量
考马斯亮蓝G-250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色,最大光吸收在465nm,当它与蛋白质结合后变为蓝色,最大光吸收在595nm。 在一定的蛋白质浓度范围内,蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比,通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白...
考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量...