在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最大光吸收来确定蛋白质的含量。 (2)实验步骤: ① Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%的磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
3. 磷酸二氢钠 4.考马斯亮蓝G-250 5. 95%乙醇 6. 85%磷酸 (三)试剂 1. 0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS,pH7.8): A母液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O(分子量358.14)71.7g; B母液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液:取NaH2PO4·2H2O(分子量156.01)31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。 0.05mol/L PB...
考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量...
【实验】SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理,制胶,跑胶,考马斯亮蓝染色实验操作,测定蛋白质的相对分子质量,,银染法 2046 9 27:19 App BCA蛋白含量测定——保姆级教程 8.2万 365 09:26 App 蛋白质含量测定——凯氏定氮法 9876 1 00:49 App 考马斯亮蓝G250和R250的区别 3629 1 00:52 App 如何3分钟完成考马斯...
考马斯亮蓝G250法是一种常用的蛋白质定量分析方法,其具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优点。 考马斯亮蓝G250是一种酸性染料,在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在465nm处。当它与蛋白质结合后,变为蓝色,最大光吸收随之转移至595nm处。这种颜色的转变是由于蛋白质与染料结合形成了复合物。 具体来说,考马斯...
【实验目的】学习掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合则呈现蓝色。染料的最大吸收从465nm变为595nm，蛋白质－染料复合物具有很高的消光系数，因此蛋白质测定的灵敏度较高，最低检出量为1µg蛋白质。特点：1、染料与蛋白质的结合，...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比...
考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者*大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成...
考马斯亮蓝染色是一种经典的蛋白染色方法,常用于凝胶中蛋白条带的显示。考马斯亮蓝染色相对其他方法操作便利,步骤简单,且与质谱兼容性很好。但在灵敏度方面,通常认为银染法更灵敏,可达0.1ng,而考马斯亮蓝法通常认为只能染出最低50-100ng的蛋白条带。 考马斯亮蓝G250...