考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
【实验原理】 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋...
染色 蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，是一种常用的微量蛋白质快速测定...
考马斯亮蓝G-250染色法测定染色法测定考马斯亮蓝蛋白质含量 【实验目的】学习掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合则呈现蓝色。染料的最大吸收从465nm变为595nm，蛋白质－染料复合物具有很高的消光系数，因此蛋白质测定的灵敏度较高，...
考马斯蓝染色原理： 不同的颜色是染料分子不同带电状态的结果。 当pH值小于0时，考马斯蓝G250染料会腐蚀所有带正电荷的三个氮原子，颜色为红色最大吸收波长为465nm。当pH值约为1时，染料的总电荷为+1（2-磺酸基团带负电，因为它们的pKa极低），所以染料是绿色的，具有吸收能力最大值为620nm，而pH...
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一：原理考马斯亮蓝G－250(GooMAssIeBrIllIAnTBlueG－250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G－250在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nM，后者在595nM。在一定蛋白质浓度范围内(1～100µg)，蛋白质与色素结合物在595nM波长下的光吸收...
学习和掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法 二. 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量属于一种染料结合法。考马斯亮蓝G-250是一种蛋白染料,其结构如下图。它在游离状态下最大吸收波长为464nm。 其中:R= H时,为R-250(R指红蓝色) R=CH3时,为G-250(G指蓝绿色) 由于它所含的疏水基团与蛋白质...
实验一考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质的含量(p24) 一、目的要求 掌握考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质含量原理和方法。 二、实验原理 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质─染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而...