考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
【实验原理】 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋...
染色 蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,是一种常用的微量蛋白质快速测定...
考马斯亮蓝G-250染色法测定染色法测定考马斯亮蓝蛋白质含量 【实验目的】学习掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,与蛋白质结合则呈现蓝色。染料的最大吸收从465nm变为595nm,蛋白质-染料复合物具有很高的消光系数,因此蛋白质测定的灵敏度较高,...
原理: 考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白...
考马斯蓝染色原理: 不同的颜色是染料分子不同带电状态的结果。 当pH值小于0时,考马斯蓝G250染料会腐蚀所有带正电荷的三个氮原子,颜色为红色最大吸收波长为465nm。当pH值约为1时,染料的总电荷为+1(2-磺酸基团带负电,因为它们的pKa极低),所以染料是绿色的,具有吸收能力最大值为620nm,而pH...
考马斯亮蓝G-250染色法实验7考马斯亮蓝G-250染色法 测定蛋白质含量 一、目的 1、学习一种蛋白质染色测定的方法 2、掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的基本原理和方法 二、原理 蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂...
实验三实验三蛋白质含量的测定蛋白质含量的测定考马斯亮蓝考马斯亮蓝G50染色法染色法原原理理考马斯亮蓝G50测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G50在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围
一、实验目的:掌握考马斯亮蓝G-250测量Pr含量的测定 二、实验原理:考马斯亮蓝G-250测量Pr含量属于染料结合法的一种,该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与Pr的疏水区结合后变为青色。前者最大光吸收在465nm,后者在595nm.在一定Pr浓度范围内(1-100ug),Pr与色素结合物在595nm波长下的吸光度与...