答:考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷...
(1)实验原理: 考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最...
这种颜色的转变是由于蛋白质与染料结合形成了复合物。 具体来说,考马斯亮蓝G250与蛋白质结合的原理主要涉及以下几个方面。 首先,考马斯亮蓝G250分子中含有磺酸基和氨基等极性基团,这些基团使得染料能够与蛋白质分子中的碱性氨基酸(如精氨酸、赖氨酸等)和芳香族氨基酸(如苯丙氨酸、酪氨酸等)的残基相互作用。 其次,...
【实验原理】 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋...
考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
40.简述考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤
原理: 考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白...
考马斯亮蓝测定蛋白质的原理是基于蛋白质与考马斯亮蓝G-250染料的结合反应。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，其最大光吸收峰位于488nm。当考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后，其光吸收峰位移至595nm，溶液的颜色也由红色变为青色。蛋白质与考马斯亮蓝G-250的结合量与其光吸收值成正比关系，因此...
实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝G―250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’s law)。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和...