(1)实验原理: 考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。其中考马斯亮蓝G-250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R-250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。测定含量 简介 该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖...
考马斯亮蓝测定蛋白质含量的原理是在酸性条件下,考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合,导致最大吸收峰由465nm变为595nm,同时颜色也由棕色变为蓝色。 考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长...
实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝G―250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’s law)。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和...
页眉 实验七考马斯亮蓝 G250 法测定的蛋白质含量 一、 试验目的 1. 学习分光光度计的原理及操作 2. 学习利用染色方法提高蛋白质消光系数,以提高分光光度法检测灵敏度 二、 基本原理 1. 根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光 光度法。该法所用的仪器称为分光光度 页眉...
简述考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤。 参考答案: (1)实验原理: 考马斯亮蓝 G-250 分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作用,两者互作的结...点击查看答案 ...
原理: 考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白...
实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝G―250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’s law)。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和...